[发明专利]利用促进牡丹生长并拮抗病原菌的细菌使牡丹种子萌发和促进牡丹幼苗生长的方法

权利要求书

1.使牡丹种子生根的方法，包括将休眠的牡丹种子进行浸种处理得到浸种后的牡丹种子，用多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）CSM1101处理所述浸种后的牡丹种子1-3小时，得到菌剂处理的牡丹种子，将所述菌剂处理的牡丹种子进行生根培养得到牡丹生根种子；所述多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）CSM1101在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.8527。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：用多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）CSM1101处理所述浸种后的牡丹种子1-3小时为将所述浸种后的牡丹种子置于所述多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的菌悬液中浸泡1-3小时。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述多粘类芽孢杆菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的菌悬液中所述多粘类芽孢杆菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的含量为10⁸cfu/ml-10⁹cfu/ml。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述多粘类芽孢杆菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的菌悬液按照包括如下步骤的方法制备：将促进牡丹生长并拮抗病原菌的菌剂悬浮于无菌水中得到所述多粘类芽孢杆菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的菌悬液，所述多粘类芽孢杆菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的菌悬液中所述多粘类芽孢杆菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的含量为10⁸cfu/ml-10⁹cfu/ml；

所述促进牡丹生长并拮抗病原菌的菌剂的制备方法包括：

(1)将玉米秸秆在180-200℃和1.0-2.0Mpa条件下进行水热处理，得到经过预处理的玉米秸秆；

(2)将所述经过预处理的玉米秸秆粉碎后，用纤维素酶进行酶解，分别收集酶解液和酶解残渣；

（3）用所述酶解液、(NH₄)₂SO₄、MgSO₄、CaCO₃、玉米浆和水配制发酵培养基，每升所述发酵培养基中所述酶解液的含量满足每升所述发酵培养基的葡萄糖含量为20-50g；

(4)向所述发酵培养基中接入促进牡丹生长并拮抗病原菌的细菌进行发酵，发酵结束后收集发酵液，将所述发酵液和所述酶解残渣混合，得到促进牡丹生长并拮抗病原菌的菌剂；所述促进牡丹生长并拮抗病原菌的细菌为多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）CSM1101，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.8527。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述水热处理时间为10-20min。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述(2)为将所述经过预处理的玉米秸秆粉碎后，按以干重计每克秸秆加入10-15FPU的比例加入纤维素酶，在55-80℃、pH为4.8-5.0的条件下在水中酶解24-48h，得到玉米秸秆酶解物，将所述玉米秸秆酶解物进行离心，分别收集上清液和沉淀，所述上清液即为所述酶解液，所述沉淀即为所述酶解残渣。

7.根据权利要求4或5或6所述的方法，其特征在于：每升所述发酵培养基中，(NH₄)₂SO₄的含量为10g，MgSO₄的含量为0.4g、CaCO₃的含量为6g、玉米浆的含量为2g；和/或，所述发酵液和所述酶解残渣按照1:1的质量比进行混合。

8.根据权利要求4或5或6或7所述的方法，其特征在于：所述(4)在30℃培养18-30小时进行发酵。