[发明专利]一种RNA的制备方法在审
| 申请号： | 201410113861.0 | 申请日： | 2014-03-25 |
| 公开（公告）号： | CN103865922A | 公开（公告）日： | 2014-06-18 |
| 发明（设计）人： | 梁兴国;王星宇 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 266100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 rna 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种RNA的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）设计与目的RNA互补的cDNA，将所述cDNA在短链DNA和DNA连接酶的作用下连接成环，形成环状cDNA；
（2）利用RNA聚合酶，以滚环扩增的形式合成出长链RNA，该长链RNA含有所需RNA序列的串联重复序列；
（3）利用特异性的核酸序列和其它酶或者化合物，将串联产物在特异性位点切割，生成所需序列。
2.如权利要求1所述的RNA的制备方法，其特征在于，在步骤（1）中，所述短链DNA序列和cDNA链的首尾序列进行碱基互补配对，并使cDNA首尾相接，形成环状cDNA。
3.如权利要求2所述的RNA的制备方法，其特征在于，所述短链DNA长度为11～15nt。
4.如权利要求3所述的RNA的制备方法，其特征在于，在步骤（2）中，所述RNA聚合酶为T7RNA聚合酶、E.coliRNA聚合酶或Syn5RNA聚合酶。
5.如权利要求4所述的RNA的制备方法，其特征在于，在步骤（3）中，所述特异性的核酸序列为氧甲基化修饰的短链DNA序列，所述DNA序列同RNA产物在预期位置互补配对结合，并在RNaseH的作用下，在特定位点切割RNA，得到目的RNA序列。
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