[发明专利]强抗基质干扰型双酚A上转换荧光层析试纸条及制备方法

说明书

技术领域

本发明特别涉及一种强抗基质干扰型快速检测双酚A的上转换荧光层析试纸条及制备方法，属于荧光免疫方法检测技术及食品安全快速检测领域。

背景技术

在近几年的研究中发现BPA(Bisphenol A， 2,2-二（4-羟基苯基）丙烷)是一种“破坏内分泌系统的化学物质”(Endocrine Disrupting Chemicals, EDCs)，具有某些雌激素的特性，对雄性生殖系统有一定的损害作用，对胚胎也有一定影响，能加速性早熟，或造成孩童多动及注意力散漫等精神障碍。BPA在低剂量时就具有DNA氧化损伤作用而且能诱导染色体异常，并能影响宿主的非特异性免疫防御系统。因此BPA 的危害引起了各国对食品及包装材料的广泛关注, 已相继有从蔬菜罐头、婴儿用调制液、食品罐等检出BPA 的报道。食品包装材料中的BPA残留越来越引起国内外重视，因此各种检测BPA的方法也开始发展起来。现有的仪器检测法虽然有灵敏度高、适用范围广等优点，但是样品前处理复杂，所需的仪器价格昂贵，检测成本高，检测时间长，而且只有特定的专业技术人员才能操作，不能进行现场、快速检测，时效性差，难以推广，很难实现对BPA进行快速、现场的检测。此外，传统的基于有机染料或者荧光量子点的荧光试纸条及胶体金试纸条在一定条件下虽然可以实现快速检测BPA，但在复杂的生物样品中（血液，尿液及唾液）含有复杂的生物样品，而染料以及荧光量子点的激发光源同时可以激发检测溶液中的生物样品的自体荧光以及侧向层析试纸条中硝酸纤维膜的背景荧光，从而对BPA的实际检测结果造成影响，降低了检测的灵敏度和准确性。同样胶体金试纸条也具有灵敏度低、检测范围窄等缺点。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种强抗基质干扰型双酚A上转换荧光层析试纸条及制备方法，从而实现对食品包装材料中双酚A含量的更加快速、灵敏、简便地检测。

为实现上述发明目的，本发明采用了如下技术方案：

一种强抗基质干扰型双酚A上转换荧光层析试纸条，包括在衬板上依次衔接的样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫，其中，所述结合垫吸附有主要由能在波长为980 nm的光源激发下发出短波长可见光区域发射光的上转换荧光纳米材料与双酚A抗体形成的上转化荧光-双酚A抗体复合物，所述包被膜上分布有检测标记，所述检测标记内包含双酚A包被抗原。

作为较为优选的实施方案之一，所述包被膜上还分布有对照标记，所述对照标记与检测标记间隔设置，并且所述对照标记内包含羊抗兔或羊抗鼠IgG。

作为较为优选的实施方案之一，所述检测标记包括以双酚A包被抗原溶液在包被膜上印制的检测线，所述对照标记包括以羊抗兔或羊抗鼠IgG抗体溶液在包被膜上印制的对照线，所述检测线与对照线平行分布。

作为较为优选的实施方案之一，所述试纸条可包括依次衔接的第一样品垫、结合垫、第二样品垫和吸水垫，其中，第二样品垫上覆设有包被膜。

一种强抗基质干扰型双酚A上转换荧光层析检测试纸条的制备方法，包括：

提供能在波长为980nm的光源激发下发出短波长发射光的上转换荧光纳米材料和双酚A抗体，并将所述上转换荧光纳米材料与双酚A抗体偶联，获得上转化荧光-双酚A抗体复合物，而后将所述上转化荧光-双酚A抗体复合物吸附于结合垫上；

提供包被膜，并至少在所述包被膜上设置检测标记，且所述检测标记内包含双酚A包被抗原；以及

提供样品垫和吸水垫，并将样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫依次衔接且附着在衬板上，获得目标产品。

作为较为优选的实施方案之一，该方法还包括：

分别以双酚A包被抗原溶液和羊抗兔或羊抗鼠IgG抗体溶液在包被膜上分别印制形成检测标记和对照标记，所述检测标记和对照标记包括平行分布的检测线与对照线。

作为较为优选的实施方案之一，该方法具体包括如下步骤：

（1）提供上转换荧光纳米材料，并在上转换荧光纳米材料修饰用以与双酚A抗体偶联的活性基团，而后将双酚A抗体与上转换荧光纳米材料偶联，获得上转化荧光-双酚A抗体复合物，而后将上转化荧光-双酚A抗体复合物施加至结合垫上；

（2）以双酚A包被抗原溶液和羊抗兔IgG抗体溶液分别在包被膜上印制形成平行分布的检测线与对照线；

（3）将样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫依次衔接且附着在衬板上，获得目标产品。

作为较为优选的实施方案之一，该方法还包括：