[发明专利]一种富硒枯草芽孢杆菌酶解物及其制备方法

说明书

技术领域

    本发明微生物技术领域，涉及利用枯草芽孢杆菌生产富硒枯草芽孢杆菌酶解物的方法和所得到的富硒枯草芽孢杆菌酶解物。

背景技术

硒是人体必需的微量元素之一，具有维护心脏生理功能增加免疫能力、对抗异常细胞和致突变作用、对抗生物体内有毒重金属、抗氧化、抗癌、排毒解毒、保肝护肝等作用。同时，硒对白内障心血管疾病、克山病、大骨节病、关节炎等疾病也有一定的防治作用。

硒以无机硒和有机硒两种形式存在，有机枯草芽孢杆菌硒具有安全高效的特点。研究表明，有机硒的中毒剂量远高于无机硒，其生物利用率也远高于无机硒产品。有机硒最主要的优点是有效硒的含量高，与亚硒酸钠比生物利用率高。Austincanor（1973）报告，在防止家禽胰腺退化方面，硒蛋氨酸的效果是亚硒酸钠的四倍，这表明有机硒的效果比无机硒（亚硒酸钠）好。

枯草芽孢杆菌作为一株安全常用菌，其菌体在生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用。这些酶类可以将大分子的蛋白质和淀粉降解为小分子的氨基酸、多肽和糖类物质。

目前，硒元素的主要来源是硒酸盐、亚硒酸盐，然而这些都是剧毒无机盐，在大规模生产过程中必定会对人体有一定程度的伤害。同时，未完全转化为有机硒的硒酸盐、亚硒酸盐经过处理后仍难以避免残存，不利于发酵食品的生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种富含有机硒的枯草芽孢杆菌酶解物及其制备方法。

为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验研究和不懈探索，最终获得了如下技术方案：

一种富硒枯草芽孢杆菌酶解物，所述的富硒枯草芽孢杆菌是将枯草芽孢杆菌在富硒培养基中培养后酶解所得，所述富硒培养基中的硒元素来源为富硒煤矸石。

一种上述富硒枯草芽孢杆菌酶解物的制备方法，该方法包括如下步骤：将富硒煤矸石通过酸液浸泡溶解硒元素，磷酸盐溶液沉降处理重金属，过滤，调节滤液pH至中性，加入枯草芽孢杆菌生长所必需的碳源和氮源得富硒培养基，灭菌，接种枯草芽孢杆菌培养，收集枯草芽孢杆菌菌体，并调节使菌体自溶，加溶菌酶后酶解细胞壁，得富硒枯草芽孢杆菌酶解物。

优选地，如上所述富硒枯草芽孢杆菌酶解物的制备方法，其中所述的酸液为亚硫酸溶液，所述的磷酸盐溶液为磷酸钠溶液。

进一步优选地，如上所述富硒枯草芽孢杆菌酶解物的制备方法，该方法具体包括如下步骤：

1）将富硒煤矸石粉碎至直径在40-100目之间，置于浓度为10%-20%（v/v）亚硫酸溶液中浸泡24-48h，同时使用超声震荡，加速富硒煤矸石中的硒元素溶解；

2）取磷酸钠溶液对富硒煤矸石中重金属进行沉淀处理，过滤，滤液用碱液调pH至中性；

3）加入枯草芽孢杆菌生长所必需的碳源和氮源得富硒培养基，灭菌，接种枯草芽孢杆菌培养，得富硒枯草芽孢杆菌；

4）将富硒枯草芽孢杆菌接种到发酵液中，发酵至其中生物量为50-70g/L；

5）发酵得到的菌液经分离浓缩得到含富硒枯草芽孢杆菌干物质100-150g/L的发酵液，调节发酵液pH值为8.5-9.5，75-85℃保温8-10h，继续升温至100℃煮沸10-60min，得到自溶枯草芽孢杆菌液；

6）待自溶枯草芽孢杆菌菌液温度降至30-40℃，调整pH值至6.5-7.0，加入自溶枯草芽孢杆菌菌液重量的0.02%-0.05%（w/v）的溶菌酶，30-40℃酶解60至90min；

7）煮沸10-30min灭酶，离心分离，去除枯草芽孢杆菌细胞壁；所得枯草芽孢杆菌发酵液经干燥后，即得富硒枯草芽孢杆菌酶解物。

再进一步优选地，如上所述富硒枯草芽孢杆菌酶解物的制备方法，其中步骤（2）中所述的碱液是以下任一种或多种碱的水溶液：氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸氢钾、氢氧化钙。

本发明在培养枯草芽孢杆菌的过程中加入硒元素，枯草芽孢杆菌生长时吸收利用了硒，使硒与枯草芽孢杆菌内的蛋白质有机结合转化为生物硒，合成硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸，从而获得了富硒枯草芽孢杆菌，其作为食品加工的原料时消除了无机硒不易被人吸收，且无机硒过量摄入容易中毒的问题。

与现有技术相比，本发明涉及的富硒枯草芽孢杆菌酶解物及其制备方法具有如下优点和进步：