[发明专利]一种富硒枯草芽孢杆菌酶解物及其制备方法

权利要求书

1.一种富硒枯草芽孢杆菌酶解物，其特征在于：所述的富硒枯草芽孢杆菌是将枯草芽孢杆菌在富硒培养基中培养后酶解所得，所述富硒培养基中的硒元素来源为富硒煤矸石。

2.一种权利要求1所述富硒枯草芽孢杆菌酶解物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：将富硒煤矸石通过酸液浸泡溶解硒元素，磷酸盐溶液沉降处理重金属，过滤，调节滤液pH至中性，加入枯草芽孢杆菌生长所必需的碳源和氮源得富硒培养基，灭菌，接种枯草芽孢杆菌培养，收集枯草芽孢杆菌菌体，并调节使菌体自溶，加溶菌酶后酶解细胞壁，得富硒枯草芽孢杆菌酶解物。

3.根据权利要求2所述富硒枯草芽孢杆菌酶解物的制备方法，其特征在于：所述的酸液为亚硫酸溶液，所述的磷酸盐溶液为磷酸钠溶液。

4.根据权利要求2所述富硒枯草芽孢杆菌酶解物的制备方法，其特征在于该方法具体包括如下步骤：

1）将富硒煤矸石粉碎至直径在40-100目之间，置于浓度为10%-20%（v/v）亚硫酸溶液中浸泡24-48h，同时使用超声震荡，加速富硒煤矸石中的硒元素溶解；

2）取磷酸钠溶液对富硒煤矸石中重金属进行沉淀处理，过滤，滤液用碱液调pH至中性；

3）加入枯草芽孢杆菌生长所必需的碳源和氮源得富硒培养基，灭菌，接种枯草芽孢杆菌培养，得富硒枯草芽孢杆菌；

4）将富硒枯草芽孢杆菌接种到发酵液中，发酵至其中生物量为50-70g/L；

5）发酵得到的菌液经分离浓缩得到含富硒枯草芽孢杆菌干物质100-150g/L的发酵液，调节发酵液pH值为8.5-9.5，75-85℃保温8-10h，继续升温至100℃煮沸10-60min，得到自溶枯草芽孢杆菌液；

6）待自溶枯草芽孢杆菌菌液温度降至30-40℃，调整pH值至6.5-7.0，加入自溶枯草芽孢杆菌菌液重量的0.02%-0.05%（w/v）的溶菌酶，30-40℃酶解60至90min；

7）煮沸10-30min灭酶，离心分离，去除枯草芽孢杆菌细胞壁；所得枯草芽孢杆菌发酵液经干燥后，即得富硒枯草芽孢杆菌酶解物。

5.根据权利要求4所述富硒枯草芽孢杆菌酶解物的制备方法，其特征在于步骤（2）中所述的碱液是以下任一种或多种碱的水溶液：氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸氢钾、氢氧化钙。