[发明专利]一种尿液中苯乙醇酸的液相色谱串联质谱测定方法有效
申请号: | 201410093956.0 | 申请日: | 2014-03-14 |
公开(公告)号: | CN103869012A | 公开(公告)日: | 2014-06-18 |
发明(设计)人: | 张小涛;杨进;侯宏卫;胡清源;王安;刘勇;韩书磊;吴帅宾;陈欢;刘彤 | 申请(专利权)人: | 国家烟草质量监督检验中心;中国科学院合肥物质科学研究院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 郑州中民专利代理有限公司 41110 | 代理人: | 姜振东 |
地址: | 450001 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 尿液 乙醇 色谱 串联 测定 方法 | ||
1.一种尿液中苯乙醇酸的液相色谱串联质谱测定方法,其特征在于:包括以下工艺步骤:
a、收集志愿者尿液;
b、样品前处理:室温下解冻尿液样品,混合均匀后,经过0.22 μm的滤膜过滤,取200 μL的尿液,加入0.80 mL纯水,取2 μL滤液引入LC-MS/MS分离分析;
c、标准工作液的配制:用纯水配制不同浓度的苯乙醇酸标准工作溶液;
d、液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定,吸取配制好的不同浓度的苯乙醇酸标准工作溶液,注入LC-MS/MS系统,苯乙醇酸的线性回归方程为y=1.35×104x-1.34×104,其中Y代表分析物的峰面积,X表示尿液中目标分析物的浓度,相关系数大于0.999,对样品待测液进行测定,测得分析物与内标峰面积的比值,代入一元线性回归方程,求得样品待测液中分析物的含量。
2.根据权利要求1所述的尿液中苯乙醇酸的液相色谱串联质谱测定方法,其特征在于:苯乙醇酸标准工作溶液的浓度分别为5,10,20,50和100 ng/mL。
3.根据权利要求1所述的尿液中苯乙醇酸的液相色谱串联质谱测定方法,其特征在于:选取了Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱,规格150 mm×2.1 mm,3.5 μm,初始流动相体系选取50% 溶剂A:水溶液和50% 溶剂B:甲醇溶液,等度洗脱,流动相流速为400 μL/min,分析时间为10 min,进样量为2 μL。
4.根据权利要求1所述的尿液中苯乙醇酸的液相色谱串联质谱测定方法,其特征在于:串联质谱检测器的条件:电喷雾离子源,多反应监测负离子扫描方式;电喷雾电压:4500V, 雾化气:50 psi, 气帘气:35 psi, 辅助加热气:30 psi,射入电压:9 V,驻留时间:100 ms。
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