[发明专利]一种烟草多糖硫酸酯的制备方法及其用途

说明书

技术领域

本发明属于烟草提取物技术领域，具体涉及一种烟草多糖硫酸酯的制备方法及其用途。

背景技术

烟草为茄科烟草属一年生或多年生植物，原产于南美洲，单叶互生，常有粘质柔毛。

烟草是一种有争议但有巨大经济效益的农作物，也是世界上种植最广泛的非粮食作物，烟草种植与产品加工在国民经济发展中发挥着重要的作用。我国引种烟草很早，产量颇大。到目前为止我国烟草的种植面积和产量均居世界首位。我国目前对于烟叶的研究仅限于香烟的加工工艺，涉及到其他行业的研究报道却很少。但由于烟叶中含有多种特殊天然植物素，如烟碱、果胶、纤维素、烟酸、茄尼醇，多糖等，所以在精细化工、日化、香精香料、食品、轻工、医药等行业都有着广泛的应用，极具开发潜质。

多糖是一类由单糖聚合而成的高分子碳水化合物，一般认为天然多糖具有较好的生物活性，具有较好的免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、延缓衰老、抗感染等功能。

天热多糖固然具有很多优异性能，但由于其结构稳定性较差、功能不够稳定，因而常用化学改性方法来进一步完善多糖功能。其中多糖酯化反应是最常用，也是最具多样性的多糖改性方法，根据化学修饰键位的不同，分为硫酸酯化、磷酸酯化或羧甲基化等，其中硫酸化修饰多糖是多糖结构修饰的一个重要的研究方向。常用的多糖硫酸酯化方法包括氯磺酸一吡啶法、浓硫酸法、三氧化硫一吡啶法及Nagasawa等，具体选择哪种方法修饰多糖，常需根据多糖主链糖单元的类型而定，一般的，吡喃型多糖采用氯磺酸一吡啶法，呋喃型多糖采用Nagasawa法。

随着人们健康意识的提高，天然抗氧化剂在食品添加剂、营养品、化妆品和医药领域得到了越来越广泛的应用，其中多糖硫酸酯也常被作为一种常用的抗氧化剂，在医疗保健、功能性饮料等领域有所应用。同其他植物体一样，烟草植物体中也含有大量的多糖，如果能够合理利用烟草植物体中的多糖开发新型的天然抗氧化剂，无疑具有巨大的经济与社会效益。

发明内容

本发明目的在于提供一种烟草多糖硫酸酯的制备方法及其用途。

本发明采用的技术方案如下：

一种烟草多糖硫酸酯的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）提取烟草多糖，具体步骤包括：

A．将烟叶粉碎，过筛；优选筛目为60目；

B．将步骤A粉碎后烟末与蒸馏水混合均匀，超声波细胞粉碎机粉碎；料液比按照质量︰体积计，烟末︰蒸馏水=1︰20~30；优选1︰25的比例，其中质量单位为g，体积单位为mL；

C．将步骤B获得的混合物进行离心，取上清液；所述离心为4℃、10000 r/min条件下，离心10~20 min，优选离心15min；

D．将步骤C所得上清液浓缩至原上清液体积的5%；所述浓缩上清液优选70℃条件下旋转蒸发浓缩；

E．将步骤D浓缩液醇析24~48h；所述醇析优选4℃条件下，无水乙醇醇析24h；

F．将步骤E醇析后液体离心取沉淀；所述离心为4℃、10000 r/min条件下，离心10~20 min，优选离心15min；

G．将步骤F所得沉淀物用蒸馏水溶解，用Sevage法脱蛋白、丙酮脱色后取水相溶液；

H．将步骤G所得水相溶液醇析24~48h后离心取沉淀，沉淀物干燥即得烟草多糖；所述醇析优选4℃条件下，无水乙醇醇析24h；淀物干燥时优选真空冷冻干燥；

（2）将步骤（1）提取的烟草多糖进行硫酸酯化修饰；具体步骤包括：

I．将步骤（1）中制备的烟草多糖混溶于DMF中，搅拌混合成均匀的悬液；搅拌优选采用磁力搅拌器搅拌，搅拌30min；

J．将步骤I制备的悬液倒入酯化试剂中，60~95℃条件下反应2~4h，反应结束后冷却至室温；优选水浴条件下，80℃搅拌反应3h；

K．将步骤J冷却后的反应液倒入0℃冷水中，NaOH溶液调节pH至7.0；所述NaOH溶液优选质量分数为15%的NaOH溶液；

L．将步骤K调节pH值后的反应液醇析24~48h，离心取沉淀物；所述醇析优选加入三倍体积的无水乙醇醇析48h；所述离心为4℃、10000 r/min条件下，离心10~20 min，优选离心15min；

M．将步骤L的沉淀物溶解，透析，透析结束后，冷冻干燥即得烟草多糖硫酸酯；所述溶解优选60℃热水溶解；所述透析优选蒸馏水透析，透析时每8h换水一次，透析72h。

步骤J中，所述酯化试剂按下述方法制备：