[发明专利]一种烟草多糖硫酸酯的制备方法及其用途

权利要求书

1.一种烟草多糖硫酸酯的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）提取烟草多糖，具体步骤包括：

A．将烟叶粉碎，过筛；

B．将步骤A粉碎后烟末与蒸馏水混合均匀，超声波细胞粉碎机粉碎；料液比按照质量︰体积计，烟末︰蒸馏水=1︰20~30，其中质量单位为g，体积单位为mL；

C．将步骤B获得的混合物进行离心，取上清液；

D．将步骤C所得上清液浓缩至原上清液体积的5%；

E．将步骤D浓缩液醇析24~48h；

F．将步骤E醇析后液体离心取沉淀；

G．将步骤F所得沉淀物用蒸馏水溶解，用Sevage法脱蛋白、丙酮脱色后取水相溶液；

H．将步骤G所得水相溶液醇析24~48h后离心取沉淀，沉淀物干燥即得烟草多糖； 

（2）将步骤（1）提取的烟草多糖进行硫酸酯化修饰；具体步骤包括：

I．将步骤（1）中制备的烟草多糖混溶于DMF中，搅拌混合成均匀的悬液； 

J．将步骤I制备的悬液倒入酯化试剂中，60~95℃条件下反应2~4h，反应结束后冷却至室温； 

K．将步骤J冷却后的反应液倒入0℃冷水中，NaOH溶液调节pH至7.0； 

L．将步骤K调节pH值后的反应液醇析24~48h，离心取沉淀物； 

M．将步骤L的沉淀物溶解，透析，透析结束后，冷冻干燥即得烟草多糖硫酸酯。

2. 如权利要求1所述烟草多糖硫酸酯的制备方法，其特征在于，步骤E、步骤H中，所述醇析为4℃条件下，无水乙醇醇析。

3.如权利要求1所述烟草多糖硫酸酯的制备方法，其特征在于，步骤J中酯化试剂采用下述方法制备：

Ⅰ．在附有冷凝装置和冰盐浴的反应容器中，加入吡啶；

Ⅱ．在步骤（1）的吡啶溶液中逐滴加入氯磺酸，至出现大量淡黄色固体时，反应结束，得酯化试剂；

步骤Ⅰ、步骤Ⅱ内氯磺酸与吡啶按体积比计，氯磺酸︰吡啶=1︰6~10。

4.如权利要求3所述烟草多糖硫酸酯的制备方法，其特征在于，氯磺酸︰吡啶的体积比=1︰6。

5.如权利要求1所述烟草多糖硫酸酯的制备方法，其特征在于，步骤D中，上清液浓缩采取70℃条件下旋转蒸发浓缩。

6.如权利要求1所述烟草多糖硫酸酯的制备方法，其特征在于，步骤L中，所述醇析为加入三倍体积的无水乙醇醇析。

7.如权利要求1所述烟草多糖硫酸酯的制备方法，其特征在于，步骤J中，所述反应为水浴条件下，80℃反应3h。

8.权利要求1所制备的烟草多糖硫酸酯作为抗氧化剂使用。