[发明专利]快速检测结核杆菌的电化学生物芯片传感阵列及制备方法

权利要求书

1.一种结核分枝杆菌快速检测的电化学生物芯片传感阵列及其制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)电化学生物芯片传感阵列Fe₃O₄SiO₂磁性纳米复合粒子及纳米Au标记的DNA探针生物传感层的制备；

(2)电化学生物芯片传感阵列辣根过氧化物酶(HRP)、过氧化氢(H₂O₂)及纳米Au标记的DNA检测探针构成的级联检测信号放大体系的制备。

2.根据权利要求1所述的电化学生物芯片传感阵列Fe₃O₄SiO₂磁性纳米复合粒子标记的DNA探针生物传感层的制备，其特征在于：

(1)取Fe₃O₄磁流体，用无水乙醇清洗两遍，然后用超声波细胞破碎仪超声分散均匀，移入三颈烧瓶中，加入氨水，在室温下以均速搅拌；

(2)向Fe₃O₄磁流体混合液中逐滴加入适量TEOS反应一定时间，反应后再次用无水乙醇清洗两遍，再用超纯水清洗两遍，得到的褐色溶液，再用浓盐酸浸泡该磁流体一周时间，将未被包裹的Fe₃O₄磁球除去，然后用超纯水清洗即Fe₃O₄SiO₂磁性纳米复合粒子；

(3)将电化学生物芯片在双蒸水中清洗两次，烘干；将液体池覆盖在电化学生物芯片表面后，一起放入电化学生物芯片反应池中；

(4)分别对应电化学生物芯片的16个反应单元中加入Fe₃O₄SiO₂磁性纳米复合粒子修饰的结核分枝杆菌检测DNA探针，然后将含有电化学生物芯片的反应池放入到充满氮气的电化学生物芯片孵育盒中孵育后，取出用无水乙醇轻轻清洗，并在氮气中烘干；

(5)分别对应电化学生物芯片的16个反应单元中加入结核分枝杆菌标本预处理混合液后放入电化学生物芯片孵育盒中。

3.根据权利要求1所述的化学生物芯片传感器阵列辣根过氧化物酶(HRP)、过氧化氢(H₂O₂)、四甲基联苯安(TMB)及纳米Au标记的结核分枝杆菌DNA检测探针构成的级联检测信号放大体系的制备，其特征在于：

(1)分别对应电化学生物芯片的16个反应单元中加入纳米Au标记的结核分枝杆菌DNA检测探针，孵育后取出用PBS轻轻冲洗；

(2)分别对应电化学生物芯片的16个反应单元中加入辣根过氧化物酶(HRP)、过氧化氢(H₂O₂)、四甲基联苯安(TMB)，通过显色反应肉眼观测显色结果。

4.根据权利要求1所述的电化学生物芯片检测大肠杆菌标准曲线的绘制，其特征在于：通过差分脉冲电流图和电流时间曲线图统计数据，根据所检测不同浓度的结核分枝杆菌绘制标准曲线。