[发明专利]酶类降解棒曲霉素的方法有效
申请号: | 201410065286.1 | 申请日: | 2014-02-26 |
公开(公告)号: | CN103859016A | 公开(公告)日: | 2014-06-18 |
发明(设计)人: | 郑晓冬;朱瑞瑜;余挺;吴涛;胡浩 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | A23B7/155 | 分类号: | A23B7/155;C12N9/00;C12R1/645 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 降解 曲霉 方法 | ||
1.酶类降解棒曲霉素的方法,其特征是:将经过棒曲霉素诱导的Rhodosporidium paludigenum Fell&Tallman的菌体制备成粗酶制剂;
将所述粗酶制剂放入被棒曲霉素污染的液态物中,降解温度为38~42℃,降解时间0.5~1h,从而进行棒曲霉素的降解;
每100μL的粗酶液至多用于降解含有16μg棒曲霉素的被棒曲霉素污染的液态物。
2.根据权利要求1所述的酶类降解棒曲霉素的方法,其特征是:
所述被棒曲霉素污染的液态物的pH≤7。
3.根据权利要求2所述的酶类降解棒曲霉素的方法,其特征是所述粗酶制剂的制备方法为:
在NYDB培养液中添加棒曲霉素,直至棒曲霉素的浓度为1ppm;得含有棒曲霉素的NYDB培养液;
将Rhodosporidium paludigenum Fell&Tallman的菌落接种到上述含有棒曲霉素的NYDB培养液中,于24~26℃、180~220rpm的摇床中培养35~37小时;培养结束后,经离心、弃去上清后用无菌水洗涤,得菌体;
按照每1g菌体配用9~11ml的pH7.0的Britton-Robinson缓冲溶液的用量比,将菌体研磨破碎后加入pH为7.0的Britton-Robinson缓冲溶液,于3~5℃、10000~14000g的条件下离心8~12min,吸取上清液作为粗酶制剂。
4.如权利要求2所述的酶类降解棒曲霉素的方法,其特征是所述粗酶制剂的制备方法为:
在NYDB培养液中添加棒曲霉素,直至棒曲霉素的浓度为1ppm;得含有棒曲霉素的NYDB培养液;
将Rhodosporidium paludigenum Fell&Tallman的菌落接种到上述含有棒曲霉素的NYDB培养液中,于24~26℃、180~220rpm的摇床中培养35~37小时;培养结束后,经离心、弃去上清后用无菌水洗涤,得菌体;
将所得的菌体于-15~-25℃放置11~13小时,然后再放入冷冻干燥机中,于-35~-45℃干燥46~50小时,得菌体冻干粉;
按照每1g菌体冻干粉配用14~16ml的pH7.0的Britton-Robinson缓冲溶液的用量比,将菌体冻干粉研磨破碎后加入pH7.0的Britton-Robinson缓冲溶液中,于3~5℃、10000~14000g的条件下离心8~12min,吸取上清液作为粗酶制剂。
5.根据权利要求3或4所述的酶类降解棒曲霉素的方法,其特征是:所述降解温度为40℃。
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