[发明专利]用于角膜重建的细菌纤维素增强羊膜复合材料的制备方法

权利要求书

1.一种用于组织工程角膜重建的细菌纤维素增强羊膜复合材料，其特征是：其组成包含细菌纤维素和经脱细胞处理并灭菌的干燥羊膜。

2.一种用于组织工程角膜重建的细菌纤维素增强羊膜复合材料的制备方法，其特征是：选取能分泌细菌纤维素的菌株活化制备成种子醪液，然后将菌株浓度为30～50wt%的种子醪液置入发酵培养基中静置培养得到细菌纤维素膜；取经脱细胞处理并灭菌的干燥羊膜浸泡在培养基中，待羊膜完全润湿后平铺于细菌纤维素膜上表面；继续静置培养1～3d，经纯化处理，干燥处理得到一种用于组织工程角膜重建的细菌纤维素增强羊膜复合材料。

3.如权利要求2所述的一种用于组织工程角膜重建的细菌纤维素增强羊膜复合材料的制备方法，其特征在于：所述的能分泌细菌纤维素的菌株选自木醋杆菌、根瘤菌属、八叠球菌属、假单胞菌属、无色杆菌属、产碱菌属、气杆菌属和固氮菌属中的一种或几种。

4.如权利要求2所述的一种用于组织工程角膜重建的细菌纤维素增强羊膜复合材料的制备方法，其特征在于：所述的静置培养得到细菌纤维素膜是指种子醪液与发酵培养基混合后置于培养容器中静置培养1～3d，得到水凝胶状细菌纤维素膜，其中种子醪液与发酵培养基体积为在培养容器中达到0.5～2cm的液面高度，得到的细菌纤维素膜厚度为0.5～2cm。

5.如权利要求2所述的一种用于组织工程角膜重建的细菌纤维素增强羊膜复合材料的制备方法，其特征在于：所述的羊膜是指来源安全，经处理去除细胞、脂肪、可溶性抗原并且辐照灭菌的脱细胞生物羊膜。

6.如权利要求2所述的一种用于组织工程角膜重建的细菌纤维素增强羊膜复合材料的制备方法，其特征在于：所述的纯化处理是指复合材料经1～3wt%的氢氧化钠水溶液30～60℃浸泡12～24h，并用去离子水清洗至中性。

7.如权利要求2所述的一种用于组织工程角膜重建的细菌纤维素增强羊膜复合材料的制备方法，其特征在于：所述的干燥处理是指冷冻干燥，将纯化处理后的复合材料在-20℃～-80℃下冷冻12～24h，然后真空干燥24～48h。

8.如权利要求2所述的一种用于组织工程角膜重建的细菌纤维素增强羊膜复合材料的制备方法，其特征在于：所述的一种用于组织工程角膜重建的细菌纤维素增强羊膜复合材料是指细菌纤维素与羊膜的复合材料，其中羊膜位于复合材料的中间层，且羊膜与上、下层的细菌纤维素膜结合紧密，羊膜材料的内部也存在细菌纤维素的微纤，并且这些微纤与上、下层的细菌纤维素膜相连接成为整体。