[发明专利]一种针对靶标的即时定量分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种针对可卡因等多种靶标的即时可视化定量分析方法，属于可视化定量分析方法技术领域。

背景技术

水凝胶是一类亲水性的高分子聚合物，能够在水环境下发生溶胀，依靠物理交联或化学交联两种方式生成。凝胶结构能够响应多种环境参数，如温度，pH，离子强度和溶剂组成等，而发生改变，因而也被称作“智能水凝胶”。基于各种传统意义上的水凝胶构建的传感器在响应各种外界信号并发生性质改变后，通常还要结合一些复杂、精密的仪器对特征变化进行表征和记录，这样往往耗时费力，不适合普及。DNA交联水凝胶的出现，极大地扩展了水凝胶传感器的应用范围（1、Liu J，Liu H，Kang H，et.al.，Aptamer-incorporated hydrogels for visual detection，controlled drug release,and targeted cancer therapy[J].Anal Bioanal Chem(2012)402:187–194.）。

核酸适体作为一类新型的分析、诊断分子，自出现以来，受到科研工作者的广泛关注。因其优于传统蛋白单克隆抗体的诸多特性，核酸适体已成为新兴的研究工具，在科研、疾病诊断和治疗试剂等方面逐步取代传统的抗体类诊断和生物技术产品（2、Gold L.，PoliskyB.，Uhlenbeck O.，et.al.，Diversity of oligonucleotide functions,Annual Review of Biochemistry[J].1995,64.763-797；3、Jayasena S.，Aptamers:An emerging class of molecules that rival antibodies in diagnostics,Clinical Chemistry[J].1999,45.1628-1650；4、Wilson D.，Szostak J.，In vitro selection of functional nucleic acids,Annual Review of Biochemistry[J].1999,68.611-647；5、Joyce G.，In-vitro evolution of nucleic-acids，Current Opinion in Structural Biology[J].1994,4.331-336.）。核酸适体是指从人工合成的DNA/RNA库中筛选得到的能够与靶标分子结合的单链寡核苷酸。核酸适体技术存在的基础是核酸适体借助氢键、范德华力、疏水作用等分子间作用力形成的特殊的三维结构，如发夹、假结、凸环、G-四聚体等（6、Li,F.,Zhang,J.,Cao,X.N.,Wang,L.H.,Li,D.,Song,S.P.,Ye,B.C.,Fan,C.H.,Adenosine detection by using gold nanoparticles and designed aptamer sequences,Analyst[J].2009,134.1355-1360.）。另一方面，核酸适体的特异性很高，如茶碱与其RNA核酸适体的亲和力相当于其类似物如咖啡因(与茶碱只相差一个碱基)的10,000倍（7、Kato,T.,Takemura,T.,Yano,K.,Ikebukuro,K.,Karube,I.,In vitro selection of DNA aptamers which bind to cholic acid,Biochimica Et Biophysica Acta-Gene Structure and Expression[J].2000,1493.12-18.），还可以将氨基酸、腺苷等生物小分子的突变体、异构体区分开来。核酸适体技术在分子生物学中的应用对象相当广泛，涵盖了离子、小分子、生物大分子以及细胞。应用目的则相对专一，主要是检测和分析。