[发明专利]一种对异鼠李素具有选择性的印迹聚合物制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明为异鼠李素分子印迹聚合物的制备，具体地说是采用本体聚合法制备一种对异鼠李素具有高选择性、高分离性能的富集分离材料。 

背景技术

异鼠李素属于银杏黄酮化合物，是天然药物中一类重要的有效成分,具有抗氧化、抗癌、保护心血管和抗炎等药理功能。目前,异鼠李素等黄酮类化合物的提取主要仍以溶剂萃取为主,依据其极性和水溶性的大小选择合适的溶剂进行分离。其他分离纯化的方法有超声波提取法、酶提取法、超临界流体萃取法、大孔树脂吸附法等，但都不同程度存在过程繁琐、设备成本高、纯度低等问题。 

分子印迹技术是模拟抗体与抗原、酶与底物等存在于自然界的分子识别作用,制备在空间结构和结合位点上与目标分子匹配，并对其具有特殊亲和性的分子识别材料。由于分子印迹聚合物（Molecular Imprinting Polymer,MIP）具备强特异性和高选择性等优点，可将一些低含量的药物有效成分直接从粗提物中筛选出来，具有良好的应用前景。空白印迹聚合物（Nonimprinted Polymer,NIP）是指未添加模板分子而合成的聚合物。本体聚合法是分子印迹技术早期所采用的方法，此法制备工艺简单，操作条件易于控制。 

发明内容

本发明采用本体聚合法制备异鼠李素分子印迹聚合物，该方法操作简单，制备出的聚合物作为吸附材料可用于从银杏黄酮粗提物中选择性提取、分离、富集异鼠李素。 

本发明通过以下技术方案实现，其步骤为： 

（1）将模板分子和功能单体按摩尔比1:4-1:8溶解到致孔剂中，超声混合脱气10-20min，密封，机械搅拌（转速100-400转/分钟）1-3h； 

（2）在步骤1的混合液中加入交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯（EDMA）， 继续搅拌，充分溶解20min，后通氮脱氧，再加入引发剂偶氮二异丁腈（AIBN），真空状态下于60-65℃恒温油浴中反应12-48h，最终得到块状固体聚合物； 

（3）将合成的聚合物机械粉碎后，过筛，并用丙酮反复沉降； 

（4）以甲醇：乙酸（V/V，9:1-5:5）为提取液，索氏提取72h以上，洗脱除去模板分子，后用甲醇平衡除去乙酸； 

（5）将所得聚合物置于真空干燥箱中60℃干燥24h，即得到异鼠李素分子印迹聚合物。 

在步骤（1）中，功能单体为丙烯酰胺（AM）、2-乙烯基吡啶（2-VP）、4-乙烯基吡啶（4-VP）、甲基丙烯酸（MAA）或1-乙烯基咪唑，致孔剂选用氯仿、丙酮、四氢呋喃THF（或加少量DMF），模板分子与致孔剂的量比为：1:6-1:15[n(mmol):V(ml)]。 

在步骤（2）中，交联剂物质的量为功能单体的3-10倍，引发剂用量为功能单体与交联剂质量之和的1-10%。 

本发明的优点是：含多孔结构的分子印迹聚合物对模板分子具有良好的吸附性能。通过吸附平衡实验及特异吸附性实验表明：该聚合物含有与模板分子空间结构相匹配、官能团相互作用的三维孔穴，具有显著的分子“记忆”功能。本发明制备的聚合物可用作固相萃取吸附材料，也可用作高效液相色谱柱填料，可达到有效分离提取异鼠李素的目的，具有广阔的应用前景。 

附图说明

图1是实施例1制得异鼠李素分子印迹聚合物的吸附等温线图。 

图2是实施例1制得异鼠李素分子印迹聚合物的吸附动力学曲线。 

图3是实施例2制得异鼠李素分子印迹聚合物的吸附平衡等温线图。 

具体实施方式

实施例1 

将1mmol模板分子异鼠李素和8mmol功能单体4-VP溶解到15ml致孔剂丙酮中，机械搅拌1h，加入交联剂EDMA40mmol，超声脱气20min，通氮脱氧40min，加入引发剂AIBN50mg，真空状态下密封，于60℃油浴中反应24h 得固体聚合物。将合成的聚合物机械粉碎并过200目分样筛，通过丙酮反复沉降2-3次除去细小颗粒后，用甲醇：乙酸（V/V，9:1）为提取液，对聚合物颗粒索氏提取72h，后再用纯甲醇索氏提取24h，平衡除去乙酸。将所得聚合物置于真空干燥箱中60℃干燥24h，即得到异鼠李素分子印迹聚合物MIP。NIP的制备不加入模板分子异鼠李素，其他条件与MIP相同。 

（1）分子印迹聚合物的吸附平衡性实验 

①分别配制2、4、6、8、10、12、14mg/L异鼠李素乙醇溶液50ml； 

②分别加入MIP（NIP）50mg于7种不同浓度溶液中；