[发明专利]免疫抑制因子MNSFbeta基因条件性敲除小鼠模型的建立及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术和医学领域。具体地说，本发明涉及MNSFβ基因缺陷的非人雌性生育障碍哺乳动物模型及其制备方法和应用。

背景技术

胚胎着床（又称植入）是指处于一定发育状态的胚胎与处于接受状态的子宫间的相互作用，导致胚胎滋养层与子宫内膜建立紧密联系并进一步发展的过程。在胚胎着床过程中，胎盘细胞的侵入机制与癌细胞在体内的浸润与扩散机制相似。整合素(Integrin)、细胞粘附分子（Cell adhesion molecule）、细胞外基质（Extracellular matrix）和基质金属蛋白酶（MMP）参与整个着床过程，并通过复杂的内分泌、自分泌和旁分泌来调节子宫内环境，但其确切的分子机制仍不是十分清楚(Murray MJ和Lessey BA,[J].Semin Reprod Endocrinol,1999.17(3):p.275-90)。

小鼠单克隆非特异性抑制因子(Mouse Monoclonal Nonspecific Suppressor Factor，MNSF)最初发现由ConA活化的小鼠T细胞杂交瘤所产生，作为一种具有非特异性免疫反应抑制作用的淋巴因子，不仅能抑制B细胞产生IgG的活性、抑制T细胞和B细胞的增殖，而且能抑制Th2细胞的产生和IL-4的分泌，以及各种小鼠源肿瘤细胞的分化(Nakamura M,Ogawa H和Tsunematsu T,[J].Cell Immunol,1988.116(1):p.230-9)。MNSF位于小鼠第19号染色体上(Lois A.Salamonsen*GN,Jock K.Findlay,[J].Journal of Reproductive Immunology,2002.53:p.215-225)，至少由α和β两个亚基组成，其中MNSFβ是MNSF发挥其生物功能的最主要成分，有报道认为MNSFβ能通过抑制TNF-α的合成来影响巨噬细胞的功能(Nakamura M,Xavier RM和Tanigawa Y,[J].Eur J Immunol,1995.25(8):p.2417-9；Xavier RM,Nakamura M和Tsunematsu T,[J].J Immunol,1994.152(5):p.2624-32；Nakamura M,Ogawa H和Tsunematsu T,[J].J Immunol,1987.138(6):p.1799-803；Nakamura M,Xavier RM,Tsunematsu T等.,[J].Proc Natl Acad Sci U S A,1995.92(8):p.3463-7)。MNSFβ基因全长cDNA为574bp，编码133个氨基酸残基的蛋白，其蛋白分子中含有2个功能域，包括N端的泛素样结构域和C端的核糖体蛋白S30样结构域。2000年Nie GY等首次发现，MNSFβ基因在小鼠胚胎着床当日的子宫组织着床部位和非着床部位存在特异性表达差异，非着床位点的表达水平显著高于着床位点，由此他们认为，理论上讲，MNSFβ在胚胎着床部位的表达应该上调才能有利于抑制母胎间的免疫反应，而实际上却是下调，因而推测MNSFβ虽然可能参与调节子宫内膜基质细胞的增殖和分化，即使参与母胎界面的免疫调节，也不是直接发挥其免疫抑制效应的(Nie GY,Li Y,Hampton AL等.,[J].Mol Reprod Dev,2000.55(4):p.351-63)，但该实验室后来未再有更多的关于MNSFβ在胚胎着床中作用基质的研究报道。

综上所述，从现有技术的研究可以看出，目前人们对MNSFβ基因对胚胎着床及怀孕期间的影响作用知之甚少，且认为其在胚胎着床过程中不是直接发挥免疫抑制作用。基于现有技术，本领域普通技术甚至可能得出MNSFβ基因并非生殖必需基因的结论。