[发明专利]检测出血性大肠杆菌O157:H7的方法及其单抗有效

申请号：	201410028114.7	申请日：	2014-01-22
公开（公告）号：	CN103777017A	公开（公告）日：	2014-05-07
发明（设计）人：	刘箐;李浩林	申请（专利权）人：	上海理工大学
主分类号：	G01N33/577	分类号：	G01N33/577;G01N33/569;C07K16/12;C12N5/20
代理公司：	上海精晟知识产权代理有限公司 31253	代理人：	冯子玲
地址：	200093 ***	国省代码：	上海;31
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摘要：
搜索关键词：	检测血性大肠杆菌 o157 h7 方法及其
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【权利要求书】：

1.一种体外检测出血性大肠杆菌O157:H7的方法，包括以下步骤：

（a）将待测样品加样于包被有捕捉抗体的固相载体，从而使待测样品中的出血性大肠杆菌O157:H7与固相载体上的捕捉抗体结合，形成带有“出血性大肠杆菌O157:H7-捕捉抗体”二元复合物的固相载体；所述的捕捉抗体是特异性地结合于出血性大肠杆菌O157:H7的单克隆抗体3A8F11B10E7，所述的单克隆抗体3A8F11B10E7由小鼠杂交瘤细胞系3A8F11B10E7，CGMCC No.8458产生；

（b）将检测抗体加样于（a）获得的固相载体，从而形成带有“检测抗体-出血性大肠杆菌O157:H7-捕捉抗体”三元复合物的固相载体；所述的检测抗体是特异性地结合于出血性大肠杆菌O157:H7的单克隆抗体GS2-D3，所述的单克隆抗体GS2-D3由小鼠杂交瘤细胞系GS2-D3，CGMCC No.6610产生，且所述的单克隆抗体GS2-D3携带一可检测标记物；和

（c）检测三元复合物中的可检测标记物，从而确定待测样品中出血性大肠杆菌O157:H7的存在与否以及存在的量。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的固相载体为酶标反应板。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的可检测标记物为辣根过氧化物酶。

4.一种免疫球蛋白，它是特异性地结合于出血性大肠杆菌O157:H7的单克隆抗体，其特征在于，它由小鼠杂交瘤细胞系3A8F11B10E7，CGMCC No.8458所产生。

5.如权利要求4所述的免疫球蛋白，其特征在于，它是以出血性大肠杆菌O157:H7，ATCC No.43895免疫Balb/c小鼠获得。

6.一种产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，其特征在于，它是小鼠杂交瘤细胞系3A8F11B10E7，CGMCC No.8458。

7.如权利要求6所述的杂交瘤细胞，其特征在于，它产生的单克隆抗体可特异性地结合于出血性大肠杆菌O157:H7。

8.一种如权利要求4所述的免疫球蛋白的用途，其特征在于，它被用于检测出血性大肠杆菌O157:H7。

9.一种免疫球蛋白，它是特异性地结合于出血性大肠杆菌O157:H7的单克隆抗体，其特征在于，它由小鼠杂交瘤细胞系GS2-D3，CGMCC No.6610所产生。

10.如权利要求9所述的免疫球蛋白，其特征在于，它是以出血性大肠杆菌O157:H7，ATCC No.43895免疫Balb/c小鼠获得。

11.一种产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，其特征在于，它是小鼠杂交瘤细胞系GS2-D3，CGMCC No.6610。

12.如权利要求11所述的杂交瘤细胞，其特征在于，它产生的单克隆抗体可特异性地结合于出血性大肠杆菌O157:H7。