[发明专利]用于制备昆虫神经元细胞的生理缓冲液、消解液及方法

权利要求书

1.一种用于制备昆虫神经元细胞的生理缓冲液，包括：氯化钠180～200mmol/L、氯化钾5～7mmol/L、氯化钙4～5mmol/L、氯化镁4～6mmol/L、磷酸二氢钠0.8～1.0mmol/L、蔗糖70～90mmol/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸10～12mmol/L、及酵母浸提物2～3g/L，pH7.2～7.4。

2.一种用于制备昆虫神经元细胞的消解液，通过将胰蛋白酶与IV型胶原蛋白酶溶于权利要求1的生理缓冲液得到，其中每10ml生理缓冲液溶有0.8-1.2mg的胰蛋白酶和6.0-14.0mg的IV型胶原蛋白酶。

3.如权利要求2所述的消解液，其中每10ml生理缓冲液溶有0.9-1.1mg的胰蛋白酶和8.0-12.0mg的IV型胶原蛋白酶。

4.一种制备昆虫神经元细胞的消化解离方法，包括：

解剖昆虫获得昆虫中枢神经索；及

用权利要求2或3的消解液消化解离所述神经索，以获得离体的神经元细胞。

5.如权利要求4所述的方法，其中消化解离温度为28～37℃，时间为20～40分钟。

6.如权利要求4所述的方法，其中所述昆虫选自鳞翅目和蜚蠊目昆虫。

7.如权利要求4所述的方法，其中解剖昆虫过程使用的生理缓冲液为权利要求1所述的生理缓冲液。

8.如权利要求4所述的方法，其中消化解离后的消化终止液为含有10%质量的胎牛血清的所述生理缓冲液。