[发明专利]一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法。

背景技术

猪去氧胆酸（Hyodesoxycholic Acid，HDCA）是广泛存在于动物胆汁中的一种生化物质，含量为0.1%～0.2%，化学名称为3α,6α-二羟基-5β-胆烷酸，分子式C₂₄H₄₀O₄，分子量为392.58，在乙醇中易溶，丙酮中微溶，在乙酸乙酯、氯仿或乙醚中极微溶解，在水中几乎不溶。HDCA具有降血脂、镇痉和祛痰的作用，临床上用于治疗高血脂症、动脉粥样硬化症、气管炎、小儿病毒性上呼吸道炎症，以及由肝胆疾病引起的消化不良；对百日咳菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌等有一定的抑制作用；作为清开灵注射剂中的有效成分，经临床观察，对急性白血病的治疗有良好作用，体外实验证明HDCA具有诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖分裂的作用。

目前，《中国药典》载入的猪去氧胆酸的含量大于90%，是采用酸碱滴定法测定的。市售猪去氧胆酸标示的含量为98%，熔点197-199℃，然而，通过薄层色谱分析表明，其中含有较多量的杂质，通过高效液相色谱进一步分析，发现除了猪去氧胆酸外，杂质含量约占9-15％左右。

目前生产猪去氧胆酸技术主要有以下三种：

1、乙酸乙酯或丙酮重结晶法，该技术主要缺点是虽能生产出熔点在195以上的产品，但产品液相纯度低，猪去氧胆酸液相纯度88-95%之间。

2、甲酯化乙酰化物衍生法，该技术虽然能生产高纯度的猪去氧胆酸，猪去氧胆酸纯度98%以上，但工艺过程中用到苯等强致癌物，工艺较繁琐，不适宜工业化生产。

3、层析柱法，该技术先将猪去胆酸粗品进行甲酯化，然后上硅胶柱进行分离，该法的主要缺点是生产周期长，生产效率低。

故此，为了提高猪去氧胆酸产品纯度，克服现有HDCA纯化方法工艺繁琐、不易操作、生产周期长、成本高等缺陷，急需开发一种具有易于工艺化大生产、成本低、生产周期短等优势的技术方法。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术中的不足之处，提供一种工艺简单，产品收率高，纯度高的猪去氧胆酸的制备方法。

为了达到上述目的，本发明采用以下方案：

一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

A、猪去氧胆酸粗品的制备

取原料，加入强碱，水，在95-100℃下皂化16-24h，冷至室温，静置，虹吸出上清液弃去，下层膏状物加入水搅拌溶解，加强酸酸化至刚果红试纸变蓝，加入乙酸乙酯搅拌萃取20-50min，静置分层，水相弃去，乙酸乙酯相加水洗至水相pH=6-7，乙酸乙酯相加入无水硫酸钠脱水，活性炭脱色，过滤，浓缩至有沉淀析出，降温至0-5℃，过滤或压榨，真空干燥，得到猪去氧胆酸粗品；其中所述原料为新鲜猪胆汁或胆红素下脚料；

B、猪去氧胆酸胺盐的制备

往步骤A中的猪去氧胆酸粗品加入醇溶剂，搅拌溶解，缓慢加入碱性有机溶剂搅拌，降温至0-5℃，有大量沉淀析出，过滤干燥得猪去氧胆酸胺盐；

C、高纯度猪去氧胆酸的制备

往步骤B中的猪去氧胆酸胺盐加入水，氢氧化钠，搅拌溶解，滴加体积比1:1盐酸，搅拌，过滤，干燥得猪去氧胆酸。

如上所述的一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法，其特征在于步骤A中所述胆红素下脚料，强碱，水的质量比为胆红素下脚料：强碱：水=1:0.1-0.5：0.1-0.3。

如上所述的一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法，其特征在于步骤A中所述的强碱为氢氧化钾或氢氧化钾。

如上所述的一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法，其特征在于步骤A中所述强酸为浓盐酸或者50%硫酸。

如上所述的一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法，其特征在于步骤A中所述乙酸乙酯与，活性炭的体积质量比为乙酸乙酯（ml）：无水硫酸钠（g）:活性炭（g）=60-100ml：1-3g：1g。

如上所述的一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法，其特征在于步骤B中猪去氧胆酸粗品与醇溶剂，碱性有机溶剂的重量体积比为猪去氧胆酸粗品（g）：醇溶剂（ml）：碱性有机溶剂（g）=1g:4-8ml:0.2-0.5g。

如上所述的一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法，其特征在于步骤C中猪去氧胆酸胺盐与水，氢氧化钠，盐酸的质量体积比为猪去氧胆酸胺盐（g）：水（ml）：氢氧化钠（g）：盐酸（ml）=1：8-12:0.05-0.15:0.4-0.8。

如上所述的一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法，其特征在于所述盐酸为1：1体积浓度的盐酸。