[发明专利]一种从脱脂蛋白乳上清液中提取多肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种多肽的制备方法，特别涉及从含脂植物脱脂蛋白乳上清液中提取多肽的方法。

背景技术

多肽是α-氨基酸以肽链连接在一起而形成的化合物，它也是蛋白质水解的中间产物。两个氨基酸分子脱水缩合可形成二肽，多个氨基酸分子脱水缩合可形成三肽、四肽、五肽等。通常由10～100个氨基酸分子脱水缩合形成的化合物叫多肽，其分子量低于10,000道尔顿，能透过半透膜，不被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。

人体对蛋白质的吸收，主要是通过蛋白酶的作用将蛋白质降解成低肽的形式进行。实验表明肽相较氨基酸能够被小肠粘膜更易、更快速的吸收。经过酶水解后的蛋白质，会得到多肽的混合物，这些混合物在酸性条件下的溶解性大大提高，并且具有浓度高粘度低的优良特性。虽然国内外对植物蛋白活性肽的研究已经达到一定水平，且相关产品已应用于医疗保健，但主要为大豆活性肽产品，对于其他植物的活性肽研究才刚刚起步，相关产品甚少，无法满足食品工业需求。

国内多肽的提取主要是从饲料饼粕中分离出蛋白质，然后经过酶解来提取多肽，不论是传统的压榨法还是浸出法，制得的粕中蛋白质都会发生一定程度的变性，这给蛋白质的深加工带来了很大的难题，导致多肽的提取率低，蛋白质利用率不高。传统工艺方法制得的粕存在很多缺陷，如压榨法中，粕中的残油率高，给蛋白质的分离纯化造成了很大的困难，且压榨法制得粕经过高温，蛋白质变性严重，更加不利于蛋白质的提取；浸出法制得的粕残留有机溶剂，直接影响蛋白质分离纯化的品质，粕经过蛋白质提取后变成了废液，无法再进行加工利用，导致原料利用不充分，浪费资源。

李雄辉，过新胜等在1999年09期《食品科学》中发表的《大豆多肽提取工艺的研究》一文中将大豆先进行低温脱溶得到豆粕，再经过水提取过程初步得到蛋白质，之后使用酸沉的办法进行蛋白质纯化，最后使用双酶对蛋白质进行水解得到多肽。这种方法原料单一，从大豆中提取蛋白质过程复杂、成本过高。徐怀德，陈金海等在200710017281.1中公开了一种核桃多肽粉的制作方法，该方法不仅保留了核桃的多种营养成分，并且核桃多肽粉多肽的含量达到了60-80%，这一发明过程首先是将核桃粕进行粉碎，然后采用超声波法浸提蛋白质。对真空干燥后的蛋白质使用木瓜蛋白酶进行酶解，经灭酶、离心、取上清液透析，经浓缩，真空干燥后即可得到多肽。这种方法从粕中提取蛋白质难度大，并且需要进一步的提纯，能源消耗大。

国内酶法多肽成熟工艺所使用的原料是蛋白含量为90%的大豆分离蛋白。大豆分离蛋白在生产过程中会产生严重的环境污染等问题，不符合我国可持续发展战略，将逐步被淘汰。其余酶解多肽大多利用饲料蛋白作为原料，通过碱溶酸沉提取蛋白质后，再利用蛋白酶来酶解制成多肽粉。这种方法有提取过程复杂，废弃物太多，蛋白提取困难等诸多问题。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种从脱脂蛋白乳上清液中提取多肽的方法，该方法减少了蛋白质的提取步骤，工艺流程短、操作简单，适于工业化生产。

为此，本发明的技术方案如下：

一种从脱脂蛋白乳上清液中提取多肽的方法，包括如下步骤：

1）将含脂植物热磨制浆，经离心机处理，得到轻相液为植物油脂，重相液为脱脂蛋白乳；

2）调节所述脱脂蛋白乳pH=4.0～5.0，再在所述脱脂蛋白乳的等电点下进行沉淀，得到脱脂乳上清液和蛋白浓浆；

3）收集所述脱脂乳上清液，并调节其pH=8.2～8.9，再向其中加入所述脱脂乳上清液质量2～4%的胰蛋白酶，在40℃、搅拌条件下酶解3.5～6h，得到酶解液；

4）将所述酶解液在85～95℃条件下加热4～8min，灭酶得到无酶液；

5）向所述无酶液中加入占其质量4～6%的活性炭，搅拌15～40min脱苦脱色；然后除去其中的活性炭，得到上清液；

6）将所述上清液浓缩至固体含量为30～40wt%后进行喷雾干燥，得到多肽粉。

所述含脂植物为核桃仁、花生仁、玉米、大豆、葵花籽、亚麻籽、菜籽、芝麻或杏仁。

步骤1）中所述脱脂蛋白乳中蛋白质含量为21～46wt%。

步骤2）中得到脱脂乳上清液和蛋白浓浆时的沉淀率为73～88%。

在步骤2）中通过HCl调节pH值。

在步骤3）中通过NaOH调节pH值。

步骤5）除去活性炭使用的是振动卸料离心机、螺旋卸料离心机。

步骤6）中上清液的浓缩方法为将所述上清液利用降膜蒸发器，在真空度850～890mbar，温度48～52℃下进行真空浓缩。