[发明专利]一种复方鳖甲软肝片的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明属于中药分析技术领域，具体涉及一种复方鳖甲软肝片的质量检测方法，特别是指纹图谱的检测方法。

背景技术

复方鳖甲软肝片是由鳖甲(制)、莪术、赤芍、当归、三七、党参、黄芪、紫河车、冬虫夏草、板蓝根、连翘十一味药组成，该品种是完全拥有自主知识产权的独家品种，是国内第一个预防、治疗慢性乙型肝炎肝纤维化以及早期肝硬化的药物，现已入选国家基本医疗保险药品目录。目前已获得2项专利授权，一种治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的中药制剂及其制备方法(专利号：ZL00105695.6)；外观设计专利(专利号：ZL99.310690.0)。复方鳖甲软肝片是国家中药保护品种，2009年完成了延长中药保护期申报工作。复方鳖甲软肝片具有软坚散结、化瘀解毒、益气养阴的功能，可用于治疗慢性乙型肝炎纤维化及早期肝硬化。

本方中鳖甲为君药，味咸性平，入肝，肾经，其既可软坚散结，又可滋阴潜阳，用于肝纤维化的瘀血凝结、肝肾阴血已伤；当归、赤芍、三七三味为臣，以增强养血活血，化瘀散结，助君药消瘕、去积聚、化痞块的作用，祛邪而不伤正；党参、黄芪健脾益气，为佐药；冬虫夏草、紫河车益肾添精，为佐药；板蓝根、连翘清热解毒，为佐药；莪术，其性苦、辛、温，入肝经血分，能引经报使，故为使药。

该复方制剂具有抗肝纤维化，主要对纤维化形成初期阶段、抑制FSCs增殖、减少胶原蛋白的合成、降低胶原蛋白在Disse腔过量沉积、对已形成的肝纤维化亦具有一定的改善作用。复方鳖甲软肝片中药制剂攻补兼施、标本兼顾，使热毒余邪得以清除，肝脾肾三脏功能得以恢复，现于肝络之瘀血得以消散，达到扶正消症的目的，有软坚散结、化瘀解毒、益气养阴的功效，有效率为81.67%，治愈率为55.23%。

中药，尤其是复方中药，其所含的任何一种成分都不能代表其整体疗效。复方鳖甲软肝片是由11味药材组成的中药复方制剂，其中的化学成分比较复杂，药品质量控制一直沿用2002年由SFDA颁布的国家药品标准(WS₃-127(Z-04)-2002(Z))。为进一步提高药品质量标准，确保产品的质量可控，确保其安全性，很必要将其现有的质量控制模式过渡到一种综合的、宏观的质量控制模式。

发明内容

中药指纹图谱是指某种中药材或中成药中所共有的、具有特征性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱。鉴于现阶段重要的有效成分绝大多数不明确的情况下，中药指纹图谱技术已经成为中药复方质量控制与评价的重要手段。中药的质量一直是中药产业化进程中的一个瓶颈问题，指纹图谱技术是欧美国家普遍采用的控制植物药中已知组分及未知组分含量的技术手段。只针对产品中的一、二个化学成分进行测定是不能全面表征和控制其质量，因此，除了用“微观分析”，还应该用某种“宏观分析”方法，从整体上有效地表征产品质量。本发明采用指纹图谱对产品质量进行控制，但如何能从更宏观的角度对复方鳖甲软肝片进行质量控制却未见报道。建立关于一种复方鳖甲软肝片的指纹图谱检测方法将弥补该品种指纹图谱研究的空白，有利于提升复方鳖甲软肝片生产的质量水平。

基于指纹图谱的质量检测方法具有重复性好，专属性强，操作简便，方法可靠等优点，本发明将采取该质量控制模式对复方鳖甲软肝片进行相关质量控制。

本发明的目的在于公开了一种复方鳖甲软肝片的质量检测方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种复方鳖甲软肝片的质量检测方法，包括对复方鳖甲软肝片中苷类成分的检测和对复方鳖甲软肝片中虫草核苷类成分的检测，其中对复方鳖甲软肝片中苷类成分的检测包括以下步骤：

(1)、复方鳖甲软肝片供试品溶液的制备：取复方鳖甲软肝片，置容量瓶中，加甲醇超声溶解，定容，即为供试品溶液；

(2)、测定：对供试品溶液用高效液相色谱仪进行测定，得到复方鳖甲软肝片中苷类成分的指纹图谱，与标准指纹图谱进行比较，以确定产品质量；高效液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱；采用梯度洗脱，其中流动相A为水溶液，流动相B为乙腈溶液，检测波长200-280nm，流速0.8-1.2ml/min，柱温20-40℃，进样量10-20ul；

对复方鳖甲软肝片中虫草核苷类成分的检测包括以下步骤：

(a)、复方鳖甲软肝片供试品溶液的制备：取复方鳖甲软肝片，置容量瓶中，加50%甲醇超声溶解，定容，即为供试品溶液；