[发明专利]一种复合骨修复材料及其制备方法

权利要求书

1.一种复合骨修复材料，其特征在于：其由一定比例的鱼鳞活性胶原蛋白、白芨胶与纳米羟基磷灰石冷冻干燥后添加交联剂进行交联，经水洗至中性，真空干燥而制成的多孔支架材料；所述鱼鳞活性胶原蛋白、白芨胶和纳米羟基磷灰石的质量比为20-30：10-15：50-70。

2.权利要求1所述的复合骨修复材料的制备方法，其特征在于包括下列步骤：

1）将鱼鳞活性胶原蛋白溶于体积分数为2%的乙酸溶液中，制成质量分数为1-2%的胶原蛋白溶液，加入配制的质量浓度为5％的纳米羟基磷灰石水溶液，采用高速分散机充分混合得到悬浮液；

2）将白芨胶浸入蒸馏水，待充分膨胀后，置50-60℃的水浴中使其溶解，加水稀释至制成质量分数为1-5%的白芨胶溶液；

3）将上述制得的胶原蛋白溶液和白芨胶溶液混合，采用高速分散机充分混合均匀；

4）将混匀后的混合溶液浇模，经冷冻干燥得到多孔支架材料，将多孔支架材料浸入交联剂进行交联，交联产物反复经蒸馏水冲洗至中性；所述交联剂为体积分数为0.2-0.3%的戊二醛，交联时间为12-24h；

5）将反复冲洗至中性的制备的交联产物置于真空干燥箱中干燥，得到复合骨修复材料，环氧乙烷消毒，包装，即得。

3.根据权利要求2所述的复合骨修复材料的制备方法，其特征在于所述鱼鳞活性胶原蛋白的制备方法为：以下所有操作均在低于10℃的条件下进行；

1）鱼鳞处理：采用鲜活的鱼体，在冰水中取鱼鳞，将鱼鳞清洗干净，水分沥干；干净后置于冰箱中冷冻待用；

2）去杂：将上述解冻后的鱼鳞原料，用0.1mol/L NaOH溶液浸泡，料液比1：20，采用组织匀浆机搅拌10-30min便可完全处理干净鳞片表面的鱼银等杂质，然后用冰水冲洗干净，使pH至中性；

3）去钙：取上述处理后的鱼鳞，用0.4mol/L HCl溶液浸泡，料液比1：20，采用磁性搅拌器搅拌，转速为300r/m，1-2h，用冰水冲洗至pH至中性，然后放入冷冻干燥器干燥，目的是去除水分，从而可以在以下步骤中节约药品、缩短时间、节约冷藏空间等。

4）提取：采用匀浆机将前处理好的鱼鳞打碎，加入瞬间变压提取灌上的高压浸渍罐中，加适量0.5mol/L冰乙酸溶液，充气加压8～10kgf/cm²，浸泡1-2小时；将高压浸渍罐内的物料放入瞬间变压提取灌上的低压提取灌内，加的料液比1：20的0.5mol/L的乙酸溶液搅拌提取3次，每2h更换溶液一次，搅拌器搅拌转速为300r/m；

所述瞬间变压提取灌包括设有搅拌器的低压提取灌，低压提取灌上设有通过联通阀连接的高压浸渍罐，所述高压浸渍罐上部设有可封闭的进料口、压力表、和连接气泵的进气阀；所述低压提取灌的罐体上设有可封闭的进料口、出渣口和放料阀；

5）提纯：将3次提取液混合，用冷冻离心机在4℃、转速5000r/m条件下离心，取上清液，用0.9mol/L NaCl溶液进行盐析，离心取沉淀；用0.5mol/L冰乙酸溶液溶解沉淀，离心取上清液，再盐析取沉淀，用截留分子量8000-14000Da透析袋透析3d，透析液分别为0.5mol/L冰乙酸、0.1mol/L冰乙酸、超纯水，透析期间每天更换2-3次溶液；

6）冷冻干燥：最后冷冻干燥后得到鱼源胶原蛋白样品。

4.根据权利要求2所述的复合骨修复材料的制备方法，其特征在于所述白芨胶的制备方法为：将白芨，粉碎，加6-8倍量的50-60℃水浸泡6-8h，时时搅拌、滤过，滤液备用；药渣再4-6倍量的50-60℃水浸泡2次，每次浸泡4h，滤过；合并3次滤液，浓缩成稠膏状，冷却后加95%乙醇，使含醇量达70%-75%，搅拌，即析出大量絮状沉液，静置1h，真空抽滤至干，真空干燥，研细，即得。