[发明专利]体外诊断装置及其使用

说明书

技术领域

本发明涉及体外诊断装置，其用于从血液或其一种组成成分的样本检测红细胞抗原和专门抵抗这些抗原的抗体之间的反应。

本发明还致力于这种装置对于识别和确定血型的使用。

背景技术

血液免疫诊断的目标是提供或诊断由抗体对红血球的攻击。为此，必要的是具有用于确定在红血球的表面处存在的抗原的工具，其存在或其缺失限定血型，但是还识别血液是否含有针对红血球已知抗原的一个或多个抗体，抗体的存在意味着不相容性的可能。

因此通常的技术包括在红细胞表面处搜索和识别血型抗原的存在或缺失，和/或搜索和识别在血浆中血型抗抗原抗体(anti–antigen antibody)的存在或缺失。

例如，对于ABO系统，Beth–Vincent测试确定通过红血球携带的抗原，且补充的Simonin–Michon测试或血清交叉检验确定血清中流动的抗体。

在Beth–Vincent测试中，个体的红血球与具有已知特性的抗体试剂在一起。通常，在抗体识别相应的红细胞抗原时，该测试通过对红血球凝聚的观察而是可见的。

在Simonin测试中，个体的血浆与红血球测试一起，所述红血球测试每一个属于ABO系统的精确抗原组。这是通过个体血浆的红血球细胞凝聚测试。

对所谓的不规则抗体的搜索检测对抗各种红细胞抗原的免疫球蛋白的个体在血液中的存在或缺失。在自身抗体研究的情况下，在直接测试中直接在个体中搜索已经固定在体内的抗体。在同种抗体搜索的情况下，目标是通过间接的Coombs技术发现在红血球测试上这些免疫球蛋白的固定，其中抗原是已知的。

存在大量过程和装置以用于血液免疫学领域中的表型分析(phenotyping)，但是血型的现有表型分析技术具有许多缺点。

例如微平板技术(Microplating technique)需要离心阶段，随后是搅动步骤。搅动步骤是关键的，因为同时存在于载体上的多种反应不具有相同的再悬浮动力学特征。因此存在解开弱凝聚而不能继续再悬浮的强凝聚的风险。必须在可使检查下执行，且必须特别注意一些试剂的粘合现象。

类似地，在执行通过凝胶测试进行的过滤技术的同时，还存在的风险是，无法检测由于因小凝聚在其进入凝胶时剪切作用而造成的分离造成的ABO血型的血浆测试期间的一些凝聚。

还有，所有这些技术存在一主要缺陷，因为它们需要离心步骤以将红血球移除，或让它们经过凝胶，还需要限流步骤(restricting step)，该步骤增加了大量时间和分析成本且需要使用难以操作的大体积离心器。

免疫过滤方法也是已知的，例如申请EP–2.167.967中描述的，其包括在样本经过带有捕获元素的多孔薄膜时捕获存在于样本中的分析物且通过显示元素(revelation element)显示其存在。这类装置包括样本的沉淀区域，亲水性多孔薄膜，在所述亲水性多孔薄膜上沉淀捕获试剂且在所述亲水性多孔薄膜下面设置吸收剂薄膜。在样本沉淀区域中执行包括沉淀纯或稀释样本的这类测试，所述样本经过多孔薄膜，以在吸收剂薄膜中完成。在经由毛细作用进入多孔薄膜的这种行进过程中，如果对应于捕获元素的分析物存在于样本中，则后者被捕获试剂固定。此外，必要的是通过能检测捕获区域上分析物存在的显示试剂显示优选分析物的捕获点上的存在，且其带有一种元素，该元素让其能被视觉地检测(被着色产物)或通过物理或化学方法被发现。

但是，该方法具有显著的敏感性和特性问题，因为在样本被沉淀时，其使得多孔薄膜展开和吸收，且许多分析物在多孔薄膜的死亡体积中损失且经过捕获区域以外。对于发现溶液有相同问题。因此必要的是使得吸收系统尺寸过大，以能沉淀要被测试的更大量的样本和发现溶液，防止执行微型化测试，其动力特点被控制，不必接收显示试剂且可被机器人吸液管利用。

试图解决该问题和集中信号，其已经在申请CA1312265或WO02052263中提出，在亲水性多孔薄膜的上方和下方插入疏水结构，其迫使流动经过捕获点。但是，这些装置仍然存在的问题是从点的离心扩散，经过捕获点且不被固定至其的显示元素将能在亲水性多孔薄膜中离心扩散和存储在点的周围。显示元素将随后避免针对所述点的清洗。存在显示元素的返回现象，其形式是通过朝向所述点的向心扩散的返回，使得即使在缺失优选分析物的情况下也能进行点着色。这种现象能非常快速地防止测试读取(通常在5到15分钟之间)，因为会出现假的阳性结果。这是非常有问题的，因为在有疑问、人的错误或信息损失的情况下，这些装置不再随后解读装置。