[发明专利]巨细胞病毒蛋白的复合物

权利要求书

1.一种用于生产分离的HCMV膜蛋白复合物的方法，所述HCMV膜蛋白复合物包含gH、gL和至少一种其他HCMV糖蛋白，所述方法包括重组表达所述gH、gL和至少一种其他HCMV糖蛋白。

2.一种用于表达HCMV膜蛋白复合物的方法，所述HCMV膜蛋白复合物包含gH、gL和至少一种其他HCMV糖蛋白，所述方法包括：

-将编码gH、gL和至少一种其他HCMV糖蛋白的一种或多种重组核酸分子导入表达系统中；

-在所述表达系统中表达所述一种或多种核酸分子；以及

-纯化所述膜蛋白复合物。

3.如权利要求2所述的方法，所述方法包括使用编码缺少跨膜结构域的gH片段的第一核酸构建体、编码gL蛋白的第二核酸构建体和编码至少一种其他HCMV糖蛋白的第三核酸构建体转染哺乳动物细胞的步骤。

4.如前述权利要求中任一项所述的方法，所述HCMV膜蛋白复合物由gH、gL和gO组成。

5.如前述权利要求中任一项所述的方法，所述HCMV膜蛋白复合物由gH、gL、pUL128、pUL130和pUL131A组成。

6.如权利要求5所述的方法，其中：

-所述pUL128包含SEQ ID NO:13、14、15或33或由其组成；

-所述pUL130包含SEQ ID NO:16、17或34或由其组成；和/或

-所述pUL131A包含SEQ ID NO:18、19、20或35或由其组成。

7.如前述权利要求中任一项所述的方法，所述HCMV膜蛋白复合物具有以质量计>85％、>86％、>87％、>88％、>89％、>90％、>91％、>92％、>93％、>94％或>95％的纯度。

8.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述HCMV膜蛋白复合物中的一种或多种gH、gL、gO、pUL128、pUL130和pUL131A：

-具有哺乳动物糖基化模式；和/或

-不含有昆虫细胞糖基化模式。

9.一种包含gH、gL和至少一种其他HCMV糖蛋白的纯化的HCMV膜蛋白复合物。

10.一种包含gH、gL和至少一种其他HCMV糖蛋白的HCMV膜蛋白复合物，所述复合物通过前述权利要求中任一项所述的方法生产。

11.一种包含权利要求9或10所述的分离的HCMV膜蛋白复合物的免疫原性组合物。

12.如权利要求11所述的免疫原性组合物，所述组合物是疫苗。

13.如权利要求11所述的免疫原性组合物，所述组合物包含佐剂。

14.如权利要求12所述的免疫原性组合物，所述佐剂是水包油乳剂或铝盐。

15.一种免疫原性组合物，其包含：

-编码HCMV膜蛋白复合物的自复制RNA分子；和

-权利要求9或10所述的HCMV膜蛋白复合物。

16.一种试剂盒，所述试剂盒包含：

-包含编码HCMV膜蛋白复合物的自复制RNA分子的初免组合物；以及

-包含权利要求9或10所述的HCMV膜蛋白复合物的加强组合物。

17.一种编码gL、缺少跨膜结构域的gH和至少一种其他HCMV糖蛋白的重组核酸分子，所述重组核酸：

(a)不是自复制RNA分子；

(b)不是α病毒复制子；

(c)不编码任何α病毒非结构蛋白，如NSP1、NSP2、NSP3和NSP4；

(d)不含：内部核糖体进入位点(IRES)，如EMCV或EV71；和/或

(e)不含病毒2A位点，如FMDV。

18.如权利要求17所述的重组核酸分子，所述重组核酸分子编码：

-gL、缺失跨膜结构域的gH、pUL128、pUL130和pUL131A；或

-gL、缺失跨膜结构域的gH和gO。