[发明专利]新的疏水蛋白释放系统

说明书

本发明涉及包含与具有治疗学和/或生物学活性的具有主要是疏水性质的蛋白质联合的特定透明质酸酰胺的药物组合物，用于制备持续缓慢的蛋白质释放系统。

发明背景

通过将活(细菌)系统进行工程化而获得的第一个药物是胰岛素，其在1982年由食品药品管理局(FDA)批准。以前从尸体中提取的人生长激素也很快进行了工程化。在1986年，FDA批准了第一个重组人疫苗，其对抗乙型肝炎。采用活系统作为生物反应器进行药物的工业化生产从此变得普及，并且现在是很多药物的优选合成方法，尤其是由于其相对低的生产成本。

通过生物工程技术生产了很多被设计用于治疗(和非治疗)用途的人蛋白质，包括红细胞生成素(用于治疗贫血)、白细胞介素2(用于治疗肾癌)、IL-1Ra(IL-1受体拮抗剂)、胰高血糖素、干扰素、人DNase酶、降钙素和很多其它蛋白质。

所述药物主要具有蛋白质或多肽性质，通常经胃肠外施用，因为口服施用将引起活性成分快速降解。但是，胃肠外施用可引起患者顺从性的问题，因为需要重复施用以确保治疗效果。这些蛋白质通常具有非常短的半衰期；例如，生长激素hGH(通过基因生产)需要每天注射。因此，为了减少施用次数和增加患者顺从性，已经进行了很多实验来开发具有增加的半衰期的蛋白质/药物释放系统。

所述释放系统必须保证药物的活性得以维持，因此必须确保蛋白质/药物的三维结构保持完整；然而，在其制备期间可发生的应激状态如有机溶剂的存在和/温度和pH的变化可引起蛋白质链的脱酰胺化或氧化，从而导致变性和治疗活性的丧失。

例如，已知PLGA(聚乳酸/乙醇酸)微球的使用是用于小肽的释放系统，其具有优良的结果(Hutchinson F.G.,Biochem.Soc.Trans.,1985,13:520-523)；然而，将其用于配制hGH释放的贮库制剂是不可能的，因为该蛋白质的变性产生了炎性问题。

对不具有毒性、但是所递送活性成分的功效未改变的蛋白质/药物释放系统所进行的持续寻找已经指向了使用用于配制的天然聚合物，其(由于它们与活性成分的联合)可以改变与它们所联合的药物的动力学。

透明质酸(HA)是由D-葡糖醛酸和N-乙酰基-D-葡糖胺的交替残基组成的杂多糖。它是一种天然的直链聚合物，分子量范围根据其获得来源和所用的制备方法为50,000至13x10⁶Da。

它天然存在于细胞外凝胶中、存在于脊椎动物结缔组织的基质(其为其中的主要组分之一)中以及存在于关节滑液、玻璃体液和脐带中。

因此，HA通过给很多组织如皮肤、腱、肌肉和软骨的细胞提供机械支持而在活生物体中发挥重要的生物学作用。

由于其性质，透明质酸保护组织免受自由基损害、控制炎性过程和刺激血管生成，并且已经证明在创伤愈合的所有主要阶段的调控中特别有效(EP1196179)。

在与透明质酸的简单联合或成盐中，使用所述多糖作为多种药物的载体是已知的，因为其生物相容性、生物降解性、无免疫原性、粘度和水合性的特性使得其特别适于用作局部和全身水平的药物和分子释放系统(EP197718、EP445255)。还已经研究了所述多糖用于特定蛋白质的药物递送，所述蛋白质例如有IL-1Ra(US 6,096,728)、红细胞生成素(Hahn SK.等人,Int J Pharm.,2006,28,322:44-51)、胰岛素(Nomura M.等人,J Pharm Pharmacol,1994,46:768-770)、生长激素(Kim SJ.等人,Journal of Controlled Release,2005,104:323-335)、干扰素和促卵泡激素(US8,025,900)。

在所有这些情况中，药物与所述多糖的联合已经导致了所载蛋白质的“缓慢”释放，但是不足以缓慢到减少药物施用次数。

HA是完全天然的多糖，其被体内存在的酶(透明质酸酶)迅速降解，相对迅速地释放出所联合的药物。由于这些原因，已经对HA的羧基和羟基进行了化学修饰以产生交联衍生物(US 4,582,865、US 4,713,448、US 5,676,964、US 4,957,74、US 5,827,937)或者用其它天然或合成聚合物或用具有不同大小和物理化学特性的分子进行了衍生化(US 4,851,521)；然而，所述衍生物的制备方法往往损害所输送药理学物质的完整性。

发明描述