[发明专利]用于真核细胞的培养基无效

专利信息
申请号: 201380024340.1 申请日: 2013-03-08
公开(公告)号: CN104302759A 公开(公告)日: 2015-01-21
发明(设计)人: 阿希谢卡·古普塔;米雷列·玛丽亚·加德利亚;多米尼克·伊夫·威利·马埃斯 申请(专利权)人: 菲仕兰产品有限公司
主分类号: C12N5/00 分类号: C12N5/00
代理公司: 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 代理人: 余刚;张英
地址: 荷兰阿*** 国省代码: 荷兰;NL
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摘要:
搜索关键词: 用于 真核细胞 培养基
【权利要求书】:

1.一种生产用于培养真核细胞的培养基的方法,包括向另外的常规培养基成分加入作为生长促进和/或生产改进的成分的以下各项的步骤:

(i)一种或多种C2-C6α-羟基酸、这些酸的盐、这些酸的酯和它们的组合;以及

(ii)一种或多种选自以下化合物的组的化合物:

a)由γ-谷氨酰基氨基酸、焦谷氨酰基氨基酸、包含谷氨酸或包含脯氨酸的二肽、氧代氨基酸、高氨基酸、N-乙酰基氨基酸和甘氨酰基-甘氨酸组成的氨基酸衍生物的组;

b)酚酸衍生物;

c)直链C2-C6或环状C6糖醇;

d)吡啶酸衍生物;和

e)选自尿嘧啶、腺嘌呤、3’-单磷酸腺苷(3’-AMP)和5’-单磷酸腺苷(AMP)的核碱基和/或核苷酸,

或选自化合物组a)、b)、c)、d)和e)的化合物的组合,

使得列于(i)和(ii)下的每种单独的化合物在所述培养基中的最终浓度是至少0.001mg/l,其中,所述化合物作为纯物质或作为浓缩物添加。

2.根据权利要求1所述的方法,其中,每种单独的化合物在所述培养基中的最终浓度是至少0.01mg/l,优选至少0.1mg/l,最优选至少1mg/l。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其中,所述C2-C6α-羟基酸选自乳酸、L-3-苯基乳酸、柠檬酸、粘(半乳糖二)酸、葡糖酸、葡糖二酸、甘油酸、2-羟基丁酸、α-羟基异戊酸、α-羟基异己酸和三羟基丁酸,优先选自乳酸、L-3-苯基乳酸和粘酸。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法,其中,所述氨基酸衍生物选自γ-谷氨酰基-酪氨酸、γ-谷氨酰基-苯丙氨酸、环甘氨酰基-谷氨酸、缬氨酰基谷氨酸、5-氧代脯氨酸和β-丙氨酸。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其中,所述酚酸选自阿魏酸((E)-3-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)丙-2-烯酸)、丁香酸(4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酸)、香草酸(4-羟基-3-甲氧基苯甲酸)、芥子酸(3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)丙-2-烯酸),这些酸的酯或这些酸的盐,优选阿魏酸、丁香酸,这些酸的酯或这些酸的盐,这些酸的盐和这些酸的酯。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法,其中,进一步将植物蛋白质水解产物加入至所述培养基。

7.根据权利要求4所述的方法,其中,所述植物蛋白质水解产物是小麦、大豆、棉花或豌豆蛋白质水解产物,或者两种或更多种这些水解产物的混合物。

8.一种通过根据权利要求1-7中任一项所述的方法可获得的细胞培养基。

9.一种用于培养真核细胞的培养基,包含至少0.001mg且至多50g/l,或者至少0.02mg/kg的干物质的以下每种单独的组分:

(i)一种或多种C2-C6α-羟基酸、这些酸的盐、这些酸的酯和它们的组合;以及

(ii)一种或多种选自以下化合物的组的化合物:

f)由γ-谷氨酰基氨基酸、焦谷氨酰基氨基酸、包含谷氨酸或包含脯氨酸的二肽、氧代氨基酸、高氨基酸、N-乙酰基氨基酸以及甘氨酰基-甘氨酸组成的氨基酸衍生物的组;

g)酚酸衍生物;

h)直链C2-C6或环状C6糖醇;

i)吡啶酸衍生物;和

j)选自尿嘧啶、腺嘌呤、3’-单磷酸腺苷(3’-AMP)和5’-单磷酸腺苷(AMP)的核碱基和/或核苷酸,

或选自化合物组a)、b)、c)、d)和e)的化合物的组合。

10.根据权利要求8或9所述的细胞培养基,包含的所列出的组分为0.01mg/l,优选至少0.1mg/l,更优选至少1mg/l,最优选至少5mg/l,或至少0.02mg/kg,优选至少0.2mg/kg,更优选至少2mg/kg,甚至更优选至少20mg/kg,最优选至少250mg/kg的干物质的浓度的列于i)和ii)下的每种单独的组分。

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