[发明专利]体外制备人工牙齿原基的方法和由其获得的人工牙齿原基

权利要求书

1.体外制备一种人工牙齿原基的方法，包括以下步骤：

a)提供多个分离的间充质牙髓细胞；以及

b)在多种非贴壁条件下培养这些间充质牙髓细胞以形成代表一种人工牙齿原基的一个细胞聚集体。

2.如权利要求1所述的方法，其中这些间充质牙髓细胞包含或组成为原代成体间充质牙髓细胞。

3.如权利要求1或2中一项所述的方法，其中这些间充质牙髓细胞源自一颗牙齿的牙髓组织，优选地源自一颗第三磨牙的髓组织。

4.如以上权利要求中一项所述的方法，其中这些间充质牙髓细胞在每ml5×10⁴到5×10⁷个的一种浓度下经受多种非贴壁培养条件。

5.如以上权利要求中一项所述的方法，其中这些间充质牙髓细胞在多种非贴壁条件下培养至少48小时。

6.如以上权利要求中一项所述的方法，其中这些间充质牙髓细胞是在多种非贴壁条件下培养，至少直到形成具有0.3mm到2mm的一种平均直径的一个细胞聚集体。

7.如以上权利要求中一项所述的方法，其中这些间充质牙髓细胞是在多种非贴壁条件下培养，至少直到所形成的该细胞聚集体展现与即将经受多种非贴壁培养条件之前的分离的间充质牙髓细胞相比，BMP4、HGF、PAX9、MSX1、I型胶原蛋白、DSPP和/或原牙质的上调的表达。

8.如以上权利要求中一项所述的方法，其中在该细胞聚集体的形成中未使用人工生物或非生物支架。

9.如以上权利要求中一项所述的方法，其中在这些间充质牙髓细胞在多种非贴壁条件下培养至少2天之后，添加多个上皮细胞且在多种非贴壁条件下共培养。

10.如权利要求9所述的方法，其中这些上皮细胞是多个角化细胞，优选地是源自皮肤或齿龈的多个角化细胞。

11.通过如权利要求1到10中一项所述的方法生产的人工牙齿原基。

12.包含如权利要求11所述的人工牙齿原基的移植物。

13.包含如权利要求11所述的人工牙齿原基或如权利要求12所述的移植物以及至少一种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

14.一种用于体外筛选多种物质的方法，这些物质调节牙齿组织的特性，该方法包括以下步骤：

-提供如权利要求11所述的人工牙齿原基或由其衍生的一个细胞聚集体或组织的一个样品；

-将该对应的样品分成多个部分；

-将至少一个部分与待筛选的一种物质一起孵育；以及

-将针对这一被处理的部分所测量的多个参数与未与这一待筛选的物质一起孵育的另一部分相比较。

15.如权利要求14所述的方法，其中在将该部分与待筛选的一种物质一起孵育之前，该部分经受一种自含式循环系统。