[发明专利]一种受体抗体融合蛋白的液体制剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种包含TNFR:Fc的水性制剂、该组合物的制备方法、给药方法以及治疗用途。

背景技术

肿瘤坏死因子（TNF）是一种涉及炎症和急性期反应的多肽细胞因子。TNF-α大量存在于患有类风湿性关节炎或克罗恩病的人中。通过生物制剂进行TNF-α的直接抑制在类风湿性关节炎的治疗中已经取得显著进步，并且这种促炎细胞因子的细胞外抑制已经被确认为一种有效的治疗。一种这样的生物制剂是依那西普。

依那西普（TNFR：Fc)是一种二聚体融合蛋白，该二聚体融合蛋白由连接到人IgG的Fc部分的人75千道尔顿（p75)肿瘤坏死因子受体（TNFR）的细胞外配体结合部分组成。依那西普的Fc组分由CH2结构域、CH3结构域以及铰链区组成，而CH1结构域是缺乏的。它是在中国仓鼠卵巢哺乳动物细胞表达系统中通过重组DNA技术产生的。它由934个氨基酸组成，并且具有大致150千道尔顿的表观分子量。

通常，蛋白质具有非常短的半寿期，并且在暴露于各种因素（如不适宜温度、水-气界面、高压、物理/机械应力、有机溶剂和微生物污染）之后经历变性（如聚集、解离和吸附在容器表面）。因此，变性蛋白失去内在的理化性质和生理活性。蛋白质的变性通常是不可逆的，因此蛋白质一旦变性，它们的天然性质可能不会恢复到初始状态。

在生物制药行业中，使用重组DNA技术制备的蛋白质在水性制剂中的长期储存通常是一项困难的任务。为了克服水性制剂中的蛋白质的稳定性问题，通过冻干（冷冻干燥）制备了更加稳定的治疗性蛋白产品。冻干产品通常伴随有用于复原的无菌水性介质。在复原之后，这些制剂典型地具有短的有效贮存寿命，即使在低温（例如，5℃)下保存时也是如此。在市场上可得到的呈冻干形式的TNF-α抑制剂的实例包括和,并且这两种组合物应当在使用之前复原。

提高蛋白多肽稳定性的典型实践可以通过改变制剂中的要素的浓度来解决,或者通过添加赋形剂来改变该制剂。

US5580856公开了通过在干燥蛋白质再水合时添加一种复原稳定剂来稳定制剂中干的燥蛋白质以防生物活性的损失。在此还描述了一种用于通过将该干燥组合物溶解于一种包含该复原稳定剂的溶剂中来生产一种制剂的试剂盒。

US6171586公开了一种稳定的水性药物制剂，该药物制剂包括未经事先冻干的治疗有效量的一种抗体、将pH保持在大约4.5到大约6.0的范围内一种缓冲剂、一种表面活性剂以及一种多元醇，同时还公开了这种制剂的用途。

EP1314437涉及一种稳定化的制剂的发明，该稳定化的制剂含有在甘氨酸缓冲剂和/或组氨酸缓冲剂中的一种抗体，同时还提供了一种含蛋白质的稳定化的制剂的制备方法,这些方法包括用一种碱性氨基酸或一种碱性氨基酸衍生物或它们的一种盐来调节pH。

EP1478394涉及含有一种免疫球蛋白的Fc结构域的多肽的适合于长期储存的一种水性药物组合物、制造方法、给药方法以及包含该组合物的试剂盒。

因此,令人希望的是提供在冷藏下具有增强的稳定性并且在正常室温下具有至少中等的稳定性的TNFR:Fc的液体制剂，从而避免来自复原程序的不便和错误的可能性。

发明内容

本发明的药物制剂包括一种纯化的多肽、缓冲剂、聚集抑制剂、渗透压调节剂、稳定剂、表面活性剂、螯合剂、以及任选地防腐剂，它们呈适当的组合。

针对治疗用途，单克隆抗体或受体抗体融合蛋白（如TNFR:Fc）以高浓度使用，并且已知高浓度的蛋白质会增加聚集。在一个方面，在制剂组合物中需要聚集抑制剂来使产品保持在天然状态并且是具有生物活性的，具有延长的保质期和增强的储存条件。存在着几种通过增加表面张力、优先结合或水合以及优先相互作用而充当聚集抑制剂的氨基酸。

聚集抑制剂降低多肽的形成聚集体的趋向。氨基酸（如天冬氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、丙氨酸、组氨酸以及赖氨酸）长时间地减少制剂中的含有Fc结构域的多肽的聚集并且是本发明的优先实施方案。

在另一个方面，需要缓冲剂来维持制剂的pH值。本发明的缓冲系统包括磷酸缓冲剂、碳酸氢盐缓冲剂、丁二酸盐缓冲剂、乙酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、氨基酸类、以及Tris缓冲剂，它们单独地或者以适当的组合而使用，提供所希望的从5..5到7.5范围的pH值。