[发明专利]一种高效微生物肥的制备方法

权利要求书

1.一种高效微生物肥的制备方法，其特征在于，将如下重量份数的菌剂混合或混合后制粒：胶质芽抱杆菌2-5份，解磷菌1-3份，枯草芽孢杆菌培养物20-35份，泡盛曲霉培养物6-8份，植物乳杆菌剂10-15份；所述枯草芽孢杆菌保藏号为CGMCC No.7926，所述植物乳杆菌保藏编号为CGMCC No.7928；

（1）所述枯草芽孢杆菌培养物的制备方法如下：

①一级种子培养：将枯草芽孢杆菌斜面菌种接入500毫升摇瓶中，培养基装量100毫升，旋转式摇床180转/分，培养温度30℃，培养时间24小时；

②二级种子培养：将一级种子按照10%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中，培养条件与一级种子相同；

③三级种子培养：将二级种子以10%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中，培养基装量1000毫升，旋转式摇床100转/分，培养温度30℃，培养时间24小时；

④一级种子罐培养：将三级种子以10%接种量接入总容积为150L的一级种子罐，发酵培养基装量100L，培养温度28℃，搅拌速度100转/分，通风量（V/V）1:0.5,罐压0.05MPa,培养时间24小时；

⑤发酵培养：将一级种子罐菌种以10%接种量接入总容积为1.5吨二级种子罐，发酵培养基装量1吨，培养条件培养温度28℃，搅拌速度100转/分，通风量（V/V）1:0.5,罐压0.05MPa,培养时间24小时。

（2）所述植物乳杆菌剂的制备方法如下：

①一级种子培养：将植物乳杆菌菌种接入500毫升摇瓶中，培养基装量100毫升，培养温度30℃，培养时间24小时；

②二级种子培养：将一级种子按照10%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中，培养条件与一级种子相同；

③三级种子培养：将二级种子以10%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中，培养基装量1000毫升，培养温度30℃，培养时间24小时；

④一级种子罐培养：将三级种子以5%接种量接入总容积为150L的一级种子罐，发酵培养基装量100L，培养温度30℃，罐压0.05MPa,培养时间18小时；

⑤发酵罐培养：将一级种子罐菌种以5%接种量接入总容积为3吨二级种子罐，发酵培养基装量2吨，培养条件培养温度30℃，罐压0.05MPa,培养时间22小时。发酵完毕发酵液经低温负压真空浓缩到原体积的45%，得到菌浓缩液；添加载体，混合均匀。

（3）所述泡盛曲霉菌剂的制备方法如下：

①斜面菌种活化培养：将泡盛曲霉斜面菌种转接到斜面培养基上，27℃培养3天；

②固体一级种子培养：挑取泡盛曲霉斜面菌种接入装有100克培养基的500毫升三角瓶中进行种子培养，30℃培养3天即可；

③固体二级种子培养：将上述培养好的固体一级种子搅拌为碎块后加入装有1000克培养基的5000毫升三角瓶中进行种子培养，培养条件：30℃培养3天即可；

④固体发酵培养：将二级摇瓶种子粉碎，加入装有灭菌培养基的发酵池或托盘中混合均匀后培养，曲料培养温度控制在26-35℃，湿度80-90%，每隔10小时翻料一次，培养时间5-7天；固体曲料的培养采用常用曲料培养技术；待培养料长满菌丝即可结束培养，培养基预先经高温蒸煮灭菌处理，灭菌条件控制温度121℃，时间1小时；

⑤干燥粉碎：发酵结束培养料在流化床或其他干燥设备上进行干燥，干燥温度控制在60℃，干燥到水分含量在10%以下，然后将固体培养料进行粉碎，物料粉碎孔径在60目以上；

2.根据权利要求1所述的一种高效微生物肥的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的培养基组成为：葡萄糖6%,酵母提取物1%,蛋白胨0.2%，CaCO₃1%,pH6.8。

3.根据权利要求1所述的一种高效微生物肥的制备方法，其特征在于，所述植物乳杆菌的培养基组成为：酪蛋白胨1%,牛肉提取物1%,酵母提取物0.5%,葡萄糖0.5%,乙酸钠0.5%,

柠檬酸二胺0.2%,Tween800.1%,K₂HPO₄0.2%,MgSO₄.7H₂O0.02%,MnSO₄.H₂O0.005%,CaCO₃2%,琼脂1.5%,pH6.8。