[发明专利]一种制备sn-2位富含共轭亚油酸甘油三酯的方法

说明书

技术领域

本发明专利涉及以固定化脂肪酶合成富含共轭亚油酸甘油酯的制备方法，属于食用油技术领域。

背景技术

共轭亚油酸（conjugated linoleic acids，CLA）是一系列碳原子数为18的多种几何与位置异构体混合物的总称。CLA 是由反刍动物体内的厌氧溶纤维丁酸弧菌亚油酸异构酶催化亚油酸转化而成的。天然的 CLA 主要存在于瘤胃动物如牛、羊的乳脂及肉制品中,每克乳脂中含量从 2～25mg不等，以c9，t11-CLA、t10，c12-CLA 形式最为普遍存在。其中c9，tl1-CLA 是唯一能被动物细胞吸收进入其磷脂层的异构体，也是与人类和动物营养最为相关、最具有生物活性的CLA，被命名为瘤胃酸。另外，t10，c12-CLA 异构体在天然存在和人工合成中含量也较高， 在改善人体的身体组成等方面具有显著作用， 同c9，t11-CLA 共同发挥着不同的生理作用，包括抑癌、减肥、调节血脂、调节血糖、调节血压、抗动脉粥样硬化、免疫调节等多种生理功能。此外，CLA还存在于植物种子中，但其异构体的分布状况与动物食品显著不同，在天然的植物种子中，并不存在具有生理活性的c9, t11-CLA 和 t10, c12-CLA。然而，无论是从动物来源还是植物来源，人们都无法从食物中直接大量获取CLA。

鉴于CLA的诸多生理功能,人们期望在膳食中含有一定量CLA的基础上大大提高其吸收率。目前,国内外市场上出现的CLA产品主要是脂肪酸形态,然而在食品不允许游离脂肪酸的大量存在，也有共轭亚油酸乙酯直接添加到植物油和食品中，但共轭亚油酸乙酯烟点低，风味差，易于氧化。所以CLA甘油酯是补充CLA 的最好形式。更值得一提的是,功能性脂肪酸位于Sn - 2位更加有利于被人体吸收利用，与CLA游离脂肪酸相比CLA的甘油酯在保持其生理和营养功能的同时,气味和味道更平和、更易于被人体和动物吸收,是一种重要的低热量油脂替代品和药物中间体合成原料。用传统化学方法合成甘油酯,存在反应温度高,设备腐蚀严重,产物色泽差等缺点,而酶催化法具有反应条件温和、产物选择性高及对环境友好等优点。目前,国内外多以酯交换法进行酶催化合成甘油酯,但产率都较低,后处理复杂,不利于工业化生产，且仅有的文献表明合成的共轭亚油酸甘油酯中，共轭亚油酸主要位于甘油三酯的sn-1,3位，不易于被人体吸收。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足提供一种制备sn-2位富含共轭亚油酸甘油三酯的方法，所制备的共轭亚油酸甘油酯中共轭亚油酸的含量在40-45%以上，其中sn-2位的共轭亚油酸超过40%，本发明的含共轭亚油酸甘油酯为淡黄色油状液体，无异味，酸值，过氧化值符合国家一级食用油标准，亦可用于制作具有抗癌等保健功能的食品。

本发明所述一种制备sn-2位富含共轭亚油酸甘油三酯的方法工艺步骤如下：

（1）原料准备：配置一系列饱和盐溶液，包括水分活度为0.22的KCH₃CO₂，水分活度为0.43的K₂CO₃，水分活度为0.65的NaNO，水分活度为0.80的 (NH4)₂SO₄，将上述各饱和盐溶液分别倒入不同干燥器中；将装有脂酶TLIM、共轭亚油酸乙酯、茶油的烧杯分别放入上述各饱和盐溶液的干燥器内，至少放置48小时，分别得到相应水分活度的脂酶TLIM，共轭亚油酸乙酯和茶油；

（2）转酯交换反应：按比例称取某一水分活度的共轭亚油酸乙酯、茶油和脂酶放入玻璃密闭反应器内，通入氮气以置换密闭容器内的空气，混合反应底物和酶进行转酯化反应；                                                                                                                                                       具体反应条件为：共轭亚油酸乙酯与茶油的摩尔比为1~3，脂酶TLIM含量为共轭亚油酸乙酯与茶油总质量的5-30%，反应温度为50~70℃，反应时间为3-96h，反应的转速为500转/分钟；

（3）除酶：对步骤（2）中反应得到的产物在2500转/分钟条件下离心10分钟，上层油液取出备用，或通过滤膜过滤或抽滤方式除去固定化的脂酶；