[发明专利]一种复合微生物菌剂及其降解腐植酸的应用和应用方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种复合微生物菌剂及其应用，具体涉及一种复合微生物菌剂以及该菌剂降解腐植酸的应用和应用该菌剂降解腐植酸的方法。 

背景技术

风化煤、褐煤、泥炭中含有大量的腐植酸（黑腐酸、棕腐酸、黄腐酸），常规方法是用碱液提取，硫酸沉淀，但是大分子的黑腐酸、棕腐酸，不溶于水，利用效率低，黄腐酸容易被利用，但是含量受限。不同地区风化煤、褐煤，三种腐植酸含量和比例差异很大，所以应用受到限制。腐植酸是动植物残骸经过长期的物理、化学、生物作用而形成的复杂有机物，人工由动植物体经发酵降解得到腐植酸，也很难进一步降解该腐植酸得到更小分子的黄腐酸。降解腐植酸目前还没有一个有效的办法。 

发明人在研究中发现，有些微生物可以降解腐植酸成小分子状态，增加其在水中的溶解性，而且活性也增加了，更增加了其应用范围和效果。 

发明内容

本发明克服现有技术的不足，所要解决的技术问题是腐植酸降解难和降解率低的问题，并且提供了一种复合微生物菌剂以及该菌剂降解腐植酸的应用，并且提供了应用该复合微生物菌剂降解腐植酸成小分子的方法。 

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：一种复合微生物菌剂，包括枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），地衣芽孢杆菌（Bacillus lincheniforms），短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus），酿酒酵母（ Saccharomyces cerevisiae），植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum），嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus），嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）和醋酸杆菌（Acetobacter）。 

所述芽孢杆菌类、酿酒酵母、乳酸菌类和醋酸杆菌的优选重量比为4-6：0.5-1：2-3.5：0.5-1，其中芽孢杆菌类的三种菌种枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和短小芽孢杆菌的重量比为1：1：1，乳酸菌类的三种菌种植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌的重量比为1：1：1。 

所述芽孢杆菌类、酿酒酵母、乳酸菌类和醋酸杆菌的用于降解腐植酸的优选重量比为5：1：3：1，其中芽孢杆菌类的三种菌种枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和短小芽孢杆菌的重量比为1：1：1，乳酸菌类的三种菌种植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌的重量比为1：1：1。 

所述复合微生物菌剂可以应用于降解腐植酸。 

利用该复合微生物菌剂降解腐植酸的方法，包括以下步骤： 

A、菌种活化培养：将八种菌种采用PDA培养基分别接种培养，培养温度27-35℃，培养时间24-36小时，pH值自然；其中好氧菌摇瓶培养，厌氧菌静置培养；检测各个培养基中细菌类活菌数大于10⁹cfu/mL酵母活菌数大于10⁷cfu/mL停止培养；

B、制备腐植酸发酵培养基：将按重量分计的原料腐植酸原料100份、蛋白类20份、糖类10份、无机盐0.1份和水500份按常规方法制备成培养基，并用蒸汽对培养基进行灭菌，121℃灭菌20分钟，然后置换空气保压，同时对培养基进行冷却到最适培养温度；其中蛋白类为黄豆粉、鱼粉和蛋白胨中的一种或多种的复配，糖类为葡萄糖、糖蜜、蔗糖中的一种或多种的复配，无机盐为磷酸二氢钾、硫酸锰、氯化钙中的一种或多种的复配；

C、腐植酸发酵降解：将活化后的八种菌种混合，得到复合微生物菌剂，将所述复合微生物菌剂接种到腐植酸发酵培养基中，接种量3%，先进行好氧发酵，发酵条件为搅拌速度180r/min，开始通气比调至1：0.5，培养期间灌压要保持在0.05Mpa左右，随着菌体的不断生长溶氧值也逐渐发生变化，因此需要调通气比和搅拌速度使溶氧相对值20%-40%，发酵时间36-48小时，发酵温度32-35℃，pH值为6.5-7.5；然后进行厌氧发酵，发酵条件为静置发酵，发酵时间48-60小时，发酵温度32℃-35℃，每六小时搅拌1分钟；pH值为4.0-4.5厌氧发酵结束得到降解的腐植酸产品。

本发明采用的腐植酸原料为腐植酸铵、腐植酸钠、腐植酸钾、风化煤、褐煤、泥炭中的一种或多种。其中，对于风化煤、褐煤、泥炭中腐植酸的发酵降解，先将其转化为腐殖酸盐为佳。 

本发明所得的腐植酸发酵液可以稀释500-1000倍作为植物生长调节剂或肥料或肥料添加剂使用。 

与现有技术相比本发明具有以下有益效果。