[发明专利]一种漆酶突变体及其编码基因与应用有效
申请号: | 201310700591.9 | 申请日: | 2013-12-18 |
公开(公告)号: | CN103710317A | 公开(公告)日: | 2014-04-09 |
发明(设计)人: | 胡美荣;周雪;陶勇 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 突变体 及其 编码 基因 应用 | ||
1.蛋白质,是如下(a)-(d)中任一种:
(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(b)由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(c)由序列表中序列5所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(d)将(a)-(c)中任一所限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加,且具有漆酶活性的蛋白质。
2.编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子。
3.根据权利要求2所述的核酸分子,其特征在于:所述核酸分子是编码权利要求1所述蛋白质的基因;所述基因是如下1)至5)中任一所述的DNA分子:
1)编码序列为序列表中序列2所示的DNA分子;
2)编码序列为序列表中序列4所示的DNA分子;
3)编码序列为序列表中序列6所示的DNA分子;
4)在严格条件下与1)-3)中任一限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子;
5)与1)-4)中任一限定的DNA分子具有90%以上同源性且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子。
4.含有权利要求2或3所述核酸分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
5.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于:所述重组载体为重组表达载体或重组克隆载体;
在所述重组表达载体中,具体由AOX1启动子启动所述基因的转录。
6.根据权利要求4所述的重组菌,其特征在于:所述重组菌为将权利要求2或3所述核酸分子导入毕赤酵母中得到的重组菌。
7.根据权利要求6所述的重组菌,其特征在于:所述毕赤酵母为毕赤酵母(Pichia pastoris)X33。
8.权利要求1所述的蛋白质,或权利要求2或3所述的核酸分子,或权利要求4-7中任一所述的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在对漆酶作用底物进行氧化反应中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:所述漆酶作用底物为2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐或愈创木酚。
10.权利要求1所述蛋白质的制备方法,包括如下步骤:培养权利要求6或7所述的重组菌,从所述重组菌中获得权利要求1所述蛋白质。
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