[发明专利]一种功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物的应用

权利要求书

1.一种功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物的应用，其特征在于：所述的功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物作为负载hBMP-2pDNA诱导hMSCs分化成成骨细胞的载体；

所述的功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物具体为：{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-(PEG-RGD)₁₀-mPEG₁₀}；其制备方法如下：

（1）将NH₂-PEG-COOH溶液与6-MAL溶液搅拌反应6-8h，得到MAL-PEG-COOH溶液，然后加入RGD-SH溶液，搅拌反应10-12h，得到RGD-PEG-COOH溶液，随后经EDC和NHS溶液活化，再加入第五代聚酰胺-胺树状大分子溶液中，反应12-30h，得到G5.NH₂-(PEG-RGD)₁₀溶液，然后将经EDC·HCl和NHS活化的mPEG-COOH溶液加入到上述G5.NH₂-(PEG-RGD)₁₀溶液中，反应12-30h，得到G5.NH₂-(PEG-RGD)₁₀-mPEG₁₀溶液；

（2）在上述G5.NH₂-(PEG-RGD)₁₀-mPEG₁₀中，加入HAuCl₄溶液，搅拌反应20-30min，再加入NaBH₄溶液，搅拌2-4h，得到{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-(PEG-RGD)₁₀-mPEG₁₀}溶液；

（3）步骤（2）所得的溶液进行透析、冷冻干燥处理，得到干燥的{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-(PEG-RGD)₁₀-mPEG₁₀}。

2.根据权利要求1所述的一种功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物的应用，其特征在于，所述的功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物与hBMP-2pDNA的N/P比为1:1～5:1，所述的N/P比为树状大分子的伯氨基与pDNA骨架上磷酸基团摩尔比。

3.根据权利要求2所述的一种功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物的应用，其特征在于，所述的功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物与hBMP-2pDNA的N/P比为1:1、2.5:1或者5:1。

4.根据权利要求1所述的一种功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物的应用，其特征在于，功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物与hBMP-2pDNA复合的方法为：

将{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-(PEG-RGD)₁₀-mPEG₁₀}用无菌水稀释，然后无菌水稀释质粒，再将二者混合均匀后于37℃孵育30min，即可。

5.根据权利要求1所述的一种功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物的应用，其特征在于，所述步骤（1）中NH₂-PEG-COOH溶液、6-MAL溶液、RGD-SH溶液、mPEG-COOH溶液的浓度均为5.8mmol/mL；第五代聚酰胺-胺树状大分子溶液的浓度为0.58mmol/mL；溶剂均为DMSO。

6.根据权利要求1所述的一种功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物的应用，其特征在于，所述步骤（2）中HAuCl₄溶液的浓度为30mg/mL，NaBH₄溶液的浓度为10mg/mL。

7.根据权利要求1所述的一种功能化聚酰胺-胺树状大分子的纳米复合物的应用，其特征在于，所述步骤（3）中透析为用去离子水透析2-3d，每天3次，每次2L去离子水，其中透析袋截留分子量为14000。