[发明专利]一种从双液相系统中提取雄烯二酮的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从双液相系统中提取雄烯二酮的方法，属于发酵分离提取技术领域。

背景技术

雄烯二酮 (Androstenedione，4-AD) 是合成多种激素药物的重要中间体， 可用于生产性激素、 孕激素、 蛋白同化激素等 100 余种药物，对机体起着非常重要的调节作用。近年来甾体药物生产持续增长，以植物甾醇为原料合成甾体药物的加工业迅速兴起，但在发酵过程中同时还生成少量雄二烯二酮 （ADD） ， 因此，4- 雄烯二酮（4-AD）、雄二烯二酮（ADD）和没有反应完的植物甾醇同时存在于发酵液中，其在溶剂中的溶解性差异不明显，分离提纯困难，现有提取工艺复杂，溶剂消耗大， 产品含量低，对环境污染严重。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，本发明提供了一种从双液相系统中提取雄烯二酮的方法。

本发明所采用的技术方案是：

（1）发酵液预处理

发酵液加热至90℃，搅拌15min，静置分层1h，下层水相放掉，上层乳化层60℃减压浓缩，蒸干水分。

（2）甲醇萃取

向步骤（1）的浓缩乳化层中加入4倍（V/V）甲醇搅拌1.5h，静置分层1h。上层甲醇相收集待用，下层油相用3倍（V/V）甲醇搅拌1.5h，静置分层1h以上，下层油相舍弃。合并两次甲醇相，静置分层20min，将残余油相分离。

（3）提取粗品

将步骤（2）的甲醇相在50℃，-0.095MPa条件下浓缩至无甲醇，冷却至室温过滤，得粗品Ⅰ。粗品Ⅰ用3倍（V/W）混合溶媒（乙酸乙酯：正己烷=2：1）4℃搅拌3h，低温过滤，得粗品Ⅱ。

（4）粗品提纯

粗品Ⅱ中用7倍（V/W）甲醇溶解,加入0.5%(W/W)活性炭，60℃加热回流1h，过滤，收集滤液，在60℃，-0.095MPa条件下浓缩至原体积的0.2倍，冷却至室温，过滤，得粗品Ⅲ。粗品Ⅲ用6倍甲醇加热溶解至澄清，在50℃，-0.095MPa条件下浓缩至原体积的0.1倍，冷却至室温，过滤，得湿成品。湿成品55℃真空干燥4h，得成品。

与现有技术相比，本发明的有益效果是利用混合溶媒进行洗晶，有效去除杂质，运用甲醇作为主要溶媒，成本低，适于工业化生产。

本发明具有下列特点：

①对乳化层减压浓缩，乳化层中的水分全部除去，油水分离充分；

②根据雄烯二酮（4-AD）易溶于甲醇的性质，用甲醇萃取乳化层，能较完全地提取出雄烯二酮（4-AD），浸提收率高，成本低；

③利用甲醇溶解后浓缩结晶，缩短结晶所需时间，母液残余量少；

④本发明提取雄烯二酮（4-AD）的方法采用了甲醇作为主溶剂，减少了溶剂种类，生产操作方便，成本低。

具体实施方式

（1）发酵液预处理

取50L 双液相发酵液，加热至90℃，搅拌15min，静置分层1h，下层水相放掉， 收集上层乳化层18L(4-AD 含量 3.79％)， 60℃减压浓缩，蒸干水分，得浓缩乳化层12.5L（4-AD含量 5.42%）。

（2）甲醇萃取

向上述浓缩乳化层12.5L中加入50L甲醇搅拌1.5h，静置分层1h。上层甲醇相收集待用(4-AD 含量 10.16g/L)，下层油相用38L甲醇搅拌1.5h，静置分层1h以上，上层甲醇相收集(4-AD 含量 4.37g/L)，下层油相舍弃。合并两次甲醇相，静置分层20min，将残余油相分离。

（3）提取粗品

将上述甲醇相在50℃，-0.095MPa条件下浓缩至无甲醇，冷却至室温过滤，得粗品Ⅰ847g（4-AD 含量 76.53%）。粗品Ⅰ用2.7L混合溶媒（乙酸乙酯：正己烷=2:1）4℃搅拌3h，低温过滤，得粗品Ⅱ763g（4-AD 含量 84.95%）。

（4）粗品提纯

粗品Ⅱ用5.5L甲醇溶解，加入40g活性炭，60℃加热回流1h，过滤，收集滤液，在60℃，-0.095MPa条件下浓缩至体积约1L，冷却至室温，过滤，得粗品Ⅲ624g（4-AD 含量 93.46%）。粗品Ⅲ用4L甲醇加热溶解至澄清，在50℃，-0.095MPa条件下浓缩至体积约400ml，冷却至室温，过滤，得湿成品560g。湿成品55℃真空干燥4h，得成品556g（4-AD 含量 99.34%）。

 （5）将上述粗品Ⅱ母液2.5L加热回流溶解，50℃，-0.095MPa条件下浓缩,得到回收油0.5L，可以在下一批次中混入乳化层用甲醇萃取。