[发明专利]一种用于检测环境污染物的转基因斑马鱼的制备方法

权利要求书

1.一种用于检测环境污染物的转基因斑马鱼的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤(1)，从斑马鱼基因组中克隆Mdr1蛋白的启动子调控序列；

步骤(2)，将步骤(1)中克隆的DNA片段融合于GFP编码序列的上游，构建成表达载体Mdr1promoter-GFP；

步骤(3)，将所述表达载体Mdt1promoter-GFP进行斑马鱼胚胎显微注射；

步骤(4)，将注射后的胚胎培养至性成熟，并与野生型斑马鱼交配产卵；

步骤(5)，荧光显微镜下筛选阳性的F1代，继续自交传至F2代，得到稳定遗传的转基因品系。

2.根据权利要求1所述的用于检测环境污染物的转基因斑马鱼的制备方法，其特征在于，步骤(1)中克隆的DNA片段来源于Mdr1蛋白编码基因的ATG起始密码子5’端上游的280bp序列。

3.根据权利要求1所述的用于检测环境污染物的转基因斑马鱼的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述表达载体Mdr1promoter-GFP注入的时间点为斑马鱼受精卵单细胞时期。