[发明专利]用于检测新布尼亚病毒的核酸和实时荧光定量检测试剂盒有效

专利信息
申请号: 201310652622.8 申请日: 2013-12-05
公开(公告)号: CN103602762A 公开(公告)日: 2014-02-26
发明(设计)人: 张丽萍;马雪征;甄维;刘丽娟;胡孔新 申请(专利权)人: 中国检验检疫科学研究院
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 北京北新智诚知识产权代理有限公司 11100 代理人: 刘茵
地址: 100123 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 用于 检测 新布尼亚 病毒 核酸 实时 荧光 定量 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种用于RT-PCR检测新布尼亚病毒的引物对,其特征在于,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。

2.一组用于检测新布尼亚病毒的实时荧光定量RT-PCR核酸,其特征在于,该组核酸包括引物对、探针和作为阳性对照的扩增产物,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示,所述探针的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,所述作为阳性对照的扩增产物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。

3.一种用于检测新布尼亚病毒的实时荧光RT-PCR的试剂盒,其特征在于,该试剂盒包括:

2×RT-PCR缓冲液;

25×RT-PCRenzymeMix;

上游引物:核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;

下游引物:核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;

探针:核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,所述探针5'端连接荧光基团,3'端连接淬灭基团;

阴性对照:无核酸酶灭菌超纯水;

阳性对照:携带有扩增产物的质粒DNA,所述扩增产物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。

4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述2×RT-PCR缓冲液为2×One-step RT-PCR buffer。

5.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述荧光基团为FAM、CY3中任一一种,所述淬灭基团为BHQ1、TAMARA、BHQ2中任一一种。

6.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,在应用该试剂盒时,按照以下终浓度配置实时荧光定量PCR反应液:

1×RT-PCR buffer;

1×RT-PCRenzymeMix;

0.8μmol/L上游引物;

0.8μmol/L下游引物;

0.12μmol/L探针。

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