[发明专利]用于检测新布尼亚病毒的核酸和实时荧光定量检测试剂盒有效
申请号: | 201310652622.8 | 申请日: | 2013-12-05 |
公开(公告)号: | CN103602762A | 公开(公告)日: | 2014-02-26 |
发明(设计)人: | 张丽萍;马雪征;甄维;刘丽娟;胡孔新 | 申请(专利权)人: | 中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京北新智诚知识产权代理有限公司 11100 | 代理人: | 刘茵 |
地址: | 100123 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 新布尼亚 病毒 核酸 实时 荧光 定量 试剂盒 | ||
1.一种用于RT-PCR检测新布尼亚病毒的引物对,其特征在于,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。
2.一组用于检测新布尼亚病毒的实时荧光定量RT-PCR核酸,其特征在于,该组核酸包括引物对、探针和作为阳性对照的扩增产物,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示,所述探针的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,所述作为阳性对照的扩增产物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。
3.一种用于检测新布尼亚病毒的实时荧光RT-PCR的试剂盒,其特征在于,该试剂盒包括:
2×RT-PCR缓冲液;
25×RT-PCRenzymeMix;
上游引物:核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;
下游引物:核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;
探针:核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,所述探针5'端连接荧光基团,3'端连接淬灭基团;
阴性对照:无核酸酶灭菌超纯水;
阳性对照:携带有扩增产物的质粒DNA,所述扩增产物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。
4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述2×RT-PCR缓冲液为2×One-step RT-PCR buffer。
5.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述荧光基团为FAM、CY3中任一一种,所述淬灭基团为BHQ1、TAMARA、BHQ2中任一一种。
6.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,在应用该试剂盒时,按照以下终浓度配置实时荧光定量PCR反应液:
1×RT-PCR buffer;
1×RT-PCRenzymeMix;
0.8μmol/L上游引物;
0.8μmol/L下游引物;
0.12μmol/L探针。
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