[发明专利]一种改进的冰冻切片方法及其应用

权利要求书

1.一种改进的冰冻切片方法，包括组织预处理步骤、组织包埋步骤，组织冰冻以及切片步骤，切片步骤后获得冰冻组织切片；其特征在于，所述组织预处理步骤为采用冰冻保护剂对组织样品进行浸泡处理。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述改进的冰冻切片方法具体包括以下步骤：

1）预处理：将组织样品放入冰冻保护剂中进行浸泡，使冰冻保护剂浸入组织样品；

2）样品包埋：将预处理后的组织样品放入冰冻切片包埋剂中浸泡，然后采用冰冻切片包埋剂包埋；

3）冰冻及切片：将包埋后的样品冻存并切片，获得冰冻组织切片。

3.如权利要求1或2任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述改进的冰冻切片方法不包括切片固定步骤。

4.如权利要求1或2任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述冰冻保护剂为二甲基亚砜溶液。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述冰冻保护剂为5～40wt%的二甲基亚砜溶液。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述二甲基亚砜溶液的溶剂选自水，5～75v/v%乙醇水溶液，或者与组织等渗的缓冲溶液。

7.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1）所述冰冻保护剂浸泡的温度条件为0～28℃；步骤2）中所述冰冻切片包埋剂的处理温度条件为0～28℃。

8.如权利要求1或2任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述改进的冰冻切片方法中，所述组织为含水量超过40wt%的组织，和/或脂质含量超过10wt%的组织。

9.权利要求1-8任一权利要求所述改进的冰冻切片方法在提高切片精细组织结构，并同时保证组织样品中生物大分子质量中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述生物大分子选自DNA、RNA以及蛋白质。

11.冰冻保护剂在组织冰冻切片技术中的应用。

12.一种制备高质量组织样品切片的方法，为采用冰冻保护剂对样品进行预处理，然后将预处理后的组织样品经冰冻切片包埋剂浸泡并包埋后，冻存并切片。