[发明专利]用于检测巴贝斯虫的引物和实时荧光定量PCR试剂盒有效
申请号: | 201310566411.2 | 申请日: | 2013-11-14 |
公开(公告)号: | CN103710433A | 公开(公告)日: | 2014-04-09 |
发明(设计)人: | 刘丽娟;陈倩;富英群 | 申请(专利权)人: | 中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/90 |
代理公司: | 北京北新智诚知识产权代理有限公司 11100 | 代理人: | 刘茵 |
地址: | 100123 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 巴贝斯虫 引物 实时 荧光 定量 pcr 试剂盒 | ||
1.一种用于PCR检测巴贝斯虫的引物对,其特征在于,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。
2.一组用于检测巴贝斯虫的实时荧光定量PCR核酸,其特征在于,该组核酸包括引物对、探针和作为阳性对照的扩增产物,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示,所述探针的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,所述作为阳性对照的扩增产物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。
3.一种用于检测巴贝斯虫的实时荧光定量PCR的试剂盒,其特征在于,该试剂盒包括:
Taq DNA聚合酶混合液(2×);
ROX染料;
引物1:核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;
引物2:核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;
TaqMan探针:核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,并且其5′标记有FAM基团、3'端标记NONE基团;
阴性对照:灭菌超纯水;
阳性对照:携带有扩增产物的质粒DNA,所述扩增产物的核苷酸序列如SEQID No.4所示。
4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述Taq DNA聚合酶混合液(2×)为PCR反应用的DNA聚合酶、Buffer、dNTP混合液的2倍浓度的混合物;所述ROX染料为ROX Reference DyeⅡ(50×)。
5.如权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,在应用该试剂盒时,按照以下终浓度配置实时荧光定量PCR反应液:
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