[发明专利]一种新的金花菌及其应用

说明书

技术领域：

本发明属于微生物领域，具体涉及一种新的金花菌及其应用。

背景技术：

湖南黑茶中特有的茯砖茶是黑茶在加工过程中通过特殊的工艺使特定的微生物在砖茶中生长，发酵转化砖茶，并在茶砖内部产生金黄色的闭囊壳，民间谓之“金花”，在其作用下使砖茶产生特殊的醇厚味道与香气。金花也成为评价茯砖茶质量的一个标准。过去多年研究确定产生金花的微生物为冠突曲霉（冠突散囊菌）。冠突曲霉的发酵液与绿茶、茶多酚复合物相比较，能更好地提高胃蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶的活性，并能抑制脂肪酶的活力，有利于淀粉、蛋白质的消化吸收，改善人体肠道功能；同时其对脂肪酶的活力的抑制，有利于阻止肠道对脂肪的吸收。

发明内容：

本发明的第一个目的是提供一种新的金花菌-假灰绿曲霉（Aspergillus pseudoglaucus）A671，该菌于2013年9月26日保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址：中国武汉市武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M2013450。

本发明的新的金花菌-假灰绿曲霉（Aspergillus pseudoglaucus）A671是从广西合浦蟠龙居茶业有限公司的墨夫人黑茶中分离获得的。

一、培养特征及形态特征：

假灰绿曲霉（Aspergillus pseudoglaucus）A671在查氏培养基上菌落生长缓慢，27℃7天直径为7-15mm；淡黄至黄色，背面白至黄色，致密；16天长满整个平皿，蜜黄色至橄榄褐色，中央黄色，背面黄褐色；分生孢子产孢结构及闭囊壳较少。

在20%蔗糖查氏培养基上菌落生长较快，27℃7天直径为50-55mm；淡黄至黄色，背面黄色，菌落平，薄；具大量闭囊壳，黄色，分生孢子产孢结构较少。闭囊壳球形，扁球形至橄椭球形，50-100×90-150μm；子囊近球形，7-13μm；子囊孢子双凸镜形，表面光滑，无脊，无沟或具浅沟痕，3.5-4.5×2.5-3.5μm。分生孢子头呈辐射形，45-70μm，顶囊半球形至烧瓶形，15-28μm，1/2至全部表面可孕，孢梗茎520-560×9-10μm；产孢结构单层，瓶梗5.6-8.3×1.5-2μm；分生孢子梨形，椭球形或近球形，两端平截，4-7×2.5-4μm，表面具密集小刺。

在40%麦芽汁酵母琼脂培养基上菌落生长迅速，27℃7天长满整个平皿，边缘白至黄色，中央灰黄绿色，气生菌丝发达，见大量分生孢子产孢结构及闭囊壳，背面橙黄褐色至黄褐色。

在37℃下，可于40%麦芽汁酵母琼脂培养基上生长，7天直径为50mm，但不能在查氏培养基及20%蔗糖查氏培养基上生长。

假灰绿曲霉（Aspergillus pseudoglaucus）A671的子囊孢子电镜图片如图1所示，其与冠突曲霉的子囊孢子（图2）相比，冠突曲霉的子囊孢子表面不光滑，赤道面生有冠状突起。

二、分子分类地位的确定

1、β-微管蛋白基因（BT2gen）：常规方法提取假灰绿曲霉（Aspergillus pseudoglaucus）A671的β-微管蛋白基因，并进行测序，其序列如SEQ ID NO.1所示，测得序列经Blastn方法，在GenBank数据库（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/）中检索该序列同源性最高的物种，结果显示，该金花菌与假灰绿曲霉具有99%以上的同源性。冠突曲霉的β-微管蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，灰绿曲霉（Aspergillus pseudoglaucus）A671和冠突曲霉的β-微管蛋白基因的序列比对分析结果如图3所示。

本发明的假灰绿曲霉（Aspergillus pseudoglaucus）A671与冠突曲霉（Aspergillus cristatus，=冠突散囊菌Eurotium cristatum，传统分离的金花菌）的主要区别：

1、冠突曲霉的子囊孢子表面不光滑，赤道面生有冠状突起；

2、冠突曲霉37℃可在查氏培养基及20%蔗糖查氏培养基上生长；

3、β-微管蛋白基因序列（BT2）序列不同。

因此，本发明的假灰绿曲霉（Aspergillus pseudoglaucus）A671是一种新的金花菌。