[发明专利]一种检测盐酸克伦特罗化学发光检测试剂盒

权利要求书

1.一种检测盐酸克伦特罗化学发光检测试剂盒，其特征在于：包括发光板、盐酸克伦特罗单克隆抗体、酶标二抗即辣根过氧化酶标记的羊抗兔的抗体、盐酸克伦特罗系列标准溶液、浓缩磷酸盐缓冲液、浓缩洗涤液、发光液、阴性对照和阳性对照；

所述发光板为乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光发光板，发光板的板孔表面底部包被有包被抗原；

所述包被抗原浓度为3ug/mL；

所述辣根过氧化酶标记的羊抗兔的抗体的工作浓度为1:5000；

所述盐酸克伦特罗系列标准溶液浓度分别为0.1ng/ml、0.2ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、2ng/ml和5ng/ml；

所述浓缩洗涤液为含有体积分数0.5%吐温20mmol/l , pH为7.8的磷酸缓冲液；

所述包被抗原由盐酸克伦特罗半抗原与卵白蛋白通过重氮化法偶联制成，具体制备如下：

a、取40mg卵白蛋白溶于浓度为0.1mol/L的磷酸盐缓冲液中，调整PH至8.6，得到卵白蛋白溶液备用；

b、取10mg盐酸克伦特罗半抗原溶于浓度为0.01mol/L 的HCl溶液中，预冷至0～-5℃，然后加入10mg的NaNO₂，在4℃下搅拌6h，然后加入步骤a的卵白蛋白溶液；

在4℃下继续搅拌6h，最后用葡聚糖凝胶Sephadex G-25凝胶过滤纯化得到盐酸克伦特罗-卵白蛋白偶联物；

所述发光底物液A的制备方法：配置0.2M pH7.4的磷酸盐缓冲液，在此缓冲液中加入鲁米诺和四苯硼钠，混合均匀；

所述发光底物液B的制备方法：配置0.2M pH7.4的磷酸盐缓冲液，在此缓冲液中加入0.1% H₂O₂；

所述阴性对照液的制备方法：选用5份以上盐酸克伦特罗检测为阴性的猪尿混合，除菌过滤保存于2～8℃；

所述阳性对照液的制备方法：选用5份以上盐酸克伦特罗检测为阳性的猪尿混合，除菌过滤保存于2～8℃。