[发明专利]一种蜡样芽孢杆菌及其生产组胺的方法

说明书

技术领域

    本发明涉及微生物领域，特别是一种蜡样芽孢杆菌及其生产组胺的方法。 

背景技术

组胺是一种活性胺化合物，化学式是C₅H₉N₃，分子量是111.15。中文同名词为1H-咪唑-4-乙胺、2-咪唑基乙胺、组织胺、Β-氨基乙基咪唑、Β-氨乙基甘噁啉、组氨、麥角胺，是合成药物的重要中间体，也可以作为生化试剂，目前，我国组胺需求量大，多数从国外进口，价格昂贵。 

传统的组胺生产是采用人工合成，这种方法生产的组胺纯度低，生产效率低，并且难以提纯。通过微生物代谢产生组胺，获得高浓度组胺液，然后提取组胺，确实能降低组胺的生产成本和能源消耗，也成为研究的主要方向。 

    蜡样芽孢杆菌是芽孢杆菌属(Bacillus)中的一种。菌体细胞杆状，末端方，成短或长链，1.0～1.2×3.0～5.0微米。产芽孢，芽孢圆形或柱形，中生或近中生，1.0～1.5微米，孢囊无明显膨大。革兰氏阳性，无荚膜，运动。菌落大，表面粗糙，扁平，不规则。兼性好氧。生长温度范围20～45℃，10℃以下生长缓慢或不生长。存在于土壤、水、空气以及动物肠道等处。与人类关系密切是引起食物中毒，中毒者症状为腹痛、呕吐腹泻。蜡状芽孢杆菌可产生抗菌物质，抑制有害微生物的繁殖，降解土壤中的营养成分，改善生态环境。可产生细菌蛋白酶；可用于麻脱胶，是各种抗生素抗菌活性的测定菌。可用于明胶液化，牛奶胨化，还原硝酸盐，水解淀粉。 

    蜡样芽胞杆菌与少数食物中毒有关，会引起一些严重的恶心、呕吐以及腹痛。但已被证实的蜡样芽孢杆菌中，未曾经高产组胺的菌株报道。 

发明内容

     针对目前人工合成组胺纯度低的问题，提供一种蜡样芽孢杆菌并通过该菌代谢产生高浓度组胺液。 

     本发明是这样实现的：一种蜡样芽孢杆菌（Serratia odorifera），其特征在于：保藏号为CGMCC No. 7781。 

     一种利用所述蜡样芽孢杆菌生产组胺的方法，其特征在于： 

1）将菌落接种于装有A培养基的试管中活化，接种量为10⁵cfu/ml，37℃静置培养24小时，重复上述步骤五次；

2）将步骤1）的菌液接种到B培养基中，接种量为10⁶cfu/ml，37℃静止培养4天；

3）将步骤2）培养的菌液放入离心机中， 10000转离心10分钟，取上清液，即为组胺液；

所述的A培养基为：改良MSA液体培养基中添加质量比为0.1%组氨酸；

所述的B培养基为：改良MSA液体培养基中添加质量比为0.005%的磷酸吡哆醛和质量比为0.1%的组氨酸。

所述改良MSA液体培养基为：蛋白胨10g，牛肉膏1g，D-甘露醇10g，NaCl 40g，酚红0.025g，蒸馏水1000mL，pH值7.2~7.6，115℃灭菌15分钟。 

 本发明的优点在于，由于保藏号为CGMCC No. 7781的蜡样芽孢杆菌（Serratia odoridera）产组胺能力强，所得组胺液浓度高，可以极大降低生产成本和节约能源。 

附图说明

图1为蜡样芽孢杆菌电子显微镜照片。 

图2为高效液相色谱检测组胺标准曲线。 

图3检测蜡样芽孢杆菌产组胺高效液相色谱图。 

具体实施方式

实施例1 

实施例1  蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus的筛选和保藏

培养基配方：

改良MSA液体培养基：蛋白胨10g，牛肉膏1g，D-甘露醇10g，NaCl 40g，酚红0.025g，蒸馏水1000mL，pH值7.2~7.6，115℃灭菌15分钟。