[发明专利]抗冠状病毒药物高通量筛选方法

权利要求书

1.用于抗冠状病毒药物高通量筛选的酵母细胞株，其包括表达各种冠状病毒的非结构蛋白nsp14但自身N7甲基转移酶缺失的酵母。

2.根据权利要求1所述的用于抗冠状病毒药物高通量筛选的酵母细胞株，其特征在于，所述冠状病毒为SARS、MERS-CoV、MHV、TGEV或IBV。

3.根据权利要求1或2所述的用于抗冠状病毒药物高通量筛选的酵母细胞株，其特征在于，所述酵母含有质粒： pMceK294A-SARS-CoV-nsp14、pMceK294A-MERS-CoV-nsp14、pMceK294A-MHV-CoV-nsp14、pMceK294A-TGEV-CoV-nsp14或pMceK294A-IBV-CoV-nsp14 。

4.权利要求1~3任一项所述的细胞株在抗冠状病毒药物高通量筛选中的应用。

5.一种抗冠状病毒药物高通量筛选的方法，该方法是将权利要求1~3任一项所述的细胞株在Trp-营养缺陷的培养基上培养，加入待选药物，通过考察药物对不同转基因的酵母抑制率，筛选药物。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，该方法使用96微孔板及384微孔板作为筛选工具。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述的Trp-营养缺陷的培养基为Trp-营养缺陷的SD液体培养基。

8.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，将经5-FOA筛选平板上生长的权利要求1~4任一项所述的细胞株接种于Trp-营养缺陷的SD液体培养基中，然后加入测试药物，通过反应酵母细胞生长数目的吸光值法来确定药物对表达不同种属N7甲基转移酶蛋白的酵母菌株生长的抑制情况。