[发明专利]太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法和装置

说明书

技术领域

本发明涉及一种毒死蜱检测方法和装置，尤其涉及一种太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法和装置。

背景技术

毒死蜱（Chlorpyrifos）是一种具有中等毒性的有机磷杀虫剂，具有触杀、胃毒和熏蒸作用，能较好地防治多种作物的地上和地下害虫。作为取代高毒有机磷杀虫剂的理想品种之一，毒死蜱大量应用于我国农业生产实践中。虽然毒死蜱对人没有太大的毒性，但对水生生物有极高毒性，可能对水体环境产生长期不良影响，因此有必要对毒死蜱进行检测。传统的毒死蜱检测方法—酶联免疫法是以抗原与抗体的特异性、可逆性结合反应为基础的农药残留检测方法，该方法具有专一性强、灵敏度高等优点。但是，酶联免疫检测在固定抗原后还需要第二次固定抗体，操作相对复杂，速度慢，难以适应日益增长的快速检测需求。因此，寻找新的毒死蜱残留检测方法并设计合理的装置具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服上述背景技术的不足，提供一种太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法和装置，该方法和装置应具有准确性高、检测快速方便的特点。

本发明采用的技术方案如下：

太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法，包括以下步骤：（1）石英玻片清洗；（2）石英玻片表面修饰；（3）石英玻片表面活化；其特征在于：该检测方法还包括以下步骤：

（4）抗体固定；

取Pluronic F-127、海藻糖，并用PBS缓冲液溶解，取溶解后的混合溶液与抗体溶液混匀，在经过表面活化的石英玻片的标记面上抗体点样N次，分别是N-1个待测点与一个参比点，保持湿润环境并过夜；

（5）石英玻片表面多余位点封闭；

配制酪蛋白/PBS溶液，充分溶解，在离心管中加入经过抗体固定的石英玻片和上述酪蛋白/PBS溶液混匀并静置；之后依次取出石英玻片，先后用去离子水、PBS缓冲液清洗石英玻片，最后在NaN₃/PBS缓冲液中保存；

（6）固定毒死蜱；

将毒死蜱溶解在PBS缓冲液中，稀释成不同待测浓度，并将待测毒死蜱溶液滴加在已封闭好的石英玻片上的待测点，湿润环境下孵育，之后清洗并用氮气吹干；

（7）采集石英玻片上待测点与参比点的太赫兹时域波谱；

将石英玻片与电机固定，通过旋转电机，利用太赫兹时域波谱系统分别采集同一石英玻片上待测点与参比点的太赫兹时域波谱；

（8）比较石英玻片待测点与参比点的太赫兹时域波谱；

画出样品上待测点与参比点的太赫兹时域波谱图形，若待测点时域谱的最高峰峰值小于参比点最高峰峰值的X值，表明该石英玻片上待测点上有毒死蜱；若待测点时域谱的最高峰峰值占参比点最高峰峰值的X值及以上，表明该石英玻片不含毒死蜱或毒死蜱浓度过低无法检测出。

所述步骤（1）包括：在石英玻片的一面上做标记，并在石英玻片中心打一个孔，先后使用去离子水、Hellmanex Ⅱ溶液、去离子水、浓盐酸/甲醇溶液、去离子水、浓硫酸和去离子水清洗，并用氮气吹干。

所述步骤（2）包括：取3-缩水甘油醚氧基丙基三甲氧基硅烷置于经过清洗的石英玻片的标记面上，取另一经过清洗且标记面朝下的石英玻片盖上，在湿润环境下修饰后分开石英玻片，之后用乙醇、甲醇、乙醇超声清洗石英玻片，氮气吹干；在石英玻片加熔融的O,O′-二(2-氨基丙基)聚丙二醇-嵌段-聚乙二醇-嵌段-聚丙二醇，烘箱内过夜后用去离子水清洗并烘干保存。

所述步骤（3）包括：称取N,N′-二琥珀酰亚胺基碳酸酯、二甲氨基吡啶，量取三乙基胺及无水二甲基甲酰胺，配置上述物质的混合液；取上述混合液置于经过表面修饰的石英玻片的标记面上，取另一经过表面修饰且标记面朝下的石英玻片盖上，活化后分开石英玻片，用甲醇超声清洗并用氮气吹干。

所述步骤（1）、（2）、（3）、（5）中石英玻片的清洗均在染色缸和染色架中进行；所述步骤（3）中混合液为粉红色。

所述X值为90%。

所述步骤（4）中Pluronic F-127质量与PBS缓冲液质量的比值为0.01%，海藻糖质量与PBS缓冲液质量的比值为20%，混合液与抗体溶液的混合比例均为1:1。

所述太赫兹时域波谱系统，在充氮气的情况下采集样本的太赫兹时域波谱；测量环境湿度要求<0.2%。