[发明专利]太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法和装置

权利要求书

1.太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法，包括以下步骤：（1）石英玻片（A）清洗；（2）石英玻片表面修饰；（3）石英玻片表面活化；其特征在于：该检测方法还包括以下步骤：

（4）抗体固定；

取Pluronic F-127、海藻糖，并用PBS缓冲液溶解，取溶解后的混合溶液与抗体溶液混匀，在经过表面活化的石英玻片的标记面（H）上抗体点样N次，分别是N-1个待测点（B）与一个参比点（C），保持湿润环境并过夜；

（5）石英玻片表面多余位点封闭；

配制酪蛋白/PBS溶液，充分溶解，在离心管中加入经过抗体固定的石英玻片和上述酪蛋白/PBS溶液混匀并静置；之后依次取出石英玻片，先后用去离子水、PBS缓冲液清洗石英玻片，最后在NaN₃/PBS缓冲液中保存；

（6）固定毒死蜱；

将毒死蜱溶解在PBS缓冲液中，稀释成不同待测浓度，并将待测毒死蜱溶液滴加在已封闭好的石英玻片上的待测点，湿润环境下孵育，之后清洗并用氮气吹干；

（7）采集石英玻片上待测点与参比点的太赫兹时域波谱；

将石英玻片与电机（E）固定，通过旋转电机，利用太赫兹时域波谱系统分别采集同一石英玻片上待测点与参比点的太赫兹时域波谱；

（8）比较石英玻片待测点与参比点的太赫兹时域波谱；

画出样品上待测点与参比点的太赫兹时域波谱图形，若待测点时域谱的最高峰峰值小于参比点最高峰峰值的X值，表明该石英玻片上待测点上有毒死蜱；若待测点时域谱的最高峰峰值占参比点最高峰峰值的X值及以上，表明该石英玻片不含毒死蜱或毒死蜱浓度过低无法检测出。

2.根据权利要求1所述的太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法，其特征在于所述步骤（1）包括：在石英玻片的一面上做标记，并在石英玻片中心打一个孔（D），先后使用去离子水、Hellmanex Ⅱ溶液、去离子水、浓盐酸/甲醇溶液、去离子水、浓硫酸和去离子水清洗，并用氮气吹干。

3.根据权利要求1所述的太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法，其特征在于所述步骤（2）包括：取3-缩水甘油醚氧基丙基三甲氧基硅烷置于经过清洗的石英玻片的标记面上，取另一经过清洗且标记面朝下的石英玻片盖上，在湿润环境下修饰后分开石英玻片，之后用乙醇、甲醇、乙醇超声清洗石英玻片，氮气吹干；在石英玻片加熔融的O,O′-二(2-氨基丙基)聚丙二醇-嵌段-聚乙二醇-嵌段-聚丙二醇，烘箱内过夜后用去离子水清洗并烘干保存。

4.根据权利要求1所述的太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法，其特征在于所述步骤（3）包括：称取N,N′-二琥珀酰亚胺基碳酸酯、二甲氨基吡啶，量取三乙基胺及无水二甲基甲酰胺，配置上述物质的混合液；取上述混合液置于经过表面修饰的石英玻片的标记面上，取另一经过表面修饰且标记面朝下的石英玻片盖上，活化后分开石英玻片，用甲醇超声清洗并用氮气吹干。

5.根据权利要求1～4任一项所述的太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法，其特征在于所述步骤（1）、（2）、（3）、（5）中石英玻片的清洗均在染色缸和染色架中进行；所述步骤（3）中混合液为粉红色。

6.根据权利要求1所述的太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法，其特征在于所述X值为90%。

7.根据权利要求1所述的太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法，其特征在于所述步骤（4）中Pluronic F-127质量与PBS缓冲液质量的比值为0.01%，海藻糖质量与PBS缓冲液质量的比值为20%，混合液与抗体溶液的混合比例均为1:1。

8.根据权利要求1所述的太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测方法，其特征在于所述太赫兹时域波谱系统，在充氮气的情况下采集样本的太赫兹时域波谱；测量环境湿度要求<0.2%。

9.太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测装置，其特征在于：所述检测装置包括太赫兹时域波谱系统、安装在该太赫兹时域波谱系统的检测内腔中的电机以及水平固定在电机转轴上的石英玻片；石英玻片上通过抗体点样形成至少一个待测点（B）以及至少一个参比点（C），石英玻片的一侧为太赫兹时域波谱系统的太赫兹波发生器（F），石英玻片的另一侧为太赫兹时域波谱系统的检测器（G）。

10.根据权利要求9所述的太赫兹波谱结合生物传感技术的毒死蜱检测装置，其特征在于：所述电机配有电机控制器，电机的转轴设置在石英玻片的中心位置并与石英玻片垂直，各待测点与转轴之间的距离等于参比点与转轴之间的距离。