[发明专利]产碱性过氧化氢酶的海洋微生物菌株YS0810

说明书

技术领域

本发明涉及海洋微生物领域，特别是涉及一株产碱性过氧化氢酶的海洋微生物菌株YS0810。 

背景技术

微生物过氧化氢酶（EC1.11.1.6）又称触酶（Catalase，简称CAT），普遍存在于好氧微生物体内。作为一种酶类清除剂，其主要功能是催化过氧化氢分解成氧气和水，防止体内羟基自由基的过量积累。基于其高效的催化活性，现已被广泛应用于临床分析、食品加工、纺织、造纸、医械器具的消毒及抗肿瘤药物的研究。近年来，过氧化氢酶由于其在纺织工业中的应用而倍受关注。多数的过氧化氢酶的应用是在碱性高温条件下进行的，而商品化的过氧化氢酶很少具有这一特性，因而限制了过氧化氢酶更多的推广应用。虽然近些年过氧化氢酶产生菌的相关研究有些报道，但碱性过氧化氢酶产生菌的筛选及应用研究鲜见。尽管目前国内微生物过氧化氢酶仍处于应用开发阶段，但随着人们对微生物过氧化氢酶的日益关注，以及研究技术和方法不断完善成熟，微生物过氧化氢酶必将成为许多应用发展的重要方向。 

现代发酵工业主要是以微生物纯培养为主，依据不同菌株的特性，应用不同的手段获得所需微生物，也可通过筛选方法最终获得新菌种。过氧化氢酶是广泛存在于各种动植物和微生物中。目前国内外对微生物源的过氧化氢酶研究有大肠杆菌、黑曲霉、芽孢杆菌、球形红假单孢菌和溶壁微球菌等。但对不动杆菌特别是海洋源的不动杆菌的研究尚未见报道。微生物过氧化氢酶种类多，且能适应各种不同的环境，尤其是海洋微生物过氧化氢酶更具有独特的生理功能和特异的性质。目前，不同来源的过氧化氢酶的研究仍是一个热点。海洋微生物为适应海洋这一生命极限环境，海洋微生物酶表现了比陆源微生物酶更为独特的生理功能与酶学特性，其开发应用潜力巨大，愈来愈引起世界各国的重视与开发。 

国内目前报道的过氧化氢酶以动植物源和微生物发酵为主，其研究主要集中在菌株的筛选，培养基和培养条件的优化，基于过氧化氢酶在纺织工业的应用的重要性，仍需开发更适碱性的过氧化氢酶。 

发明内容

本发明的目的在于经发明人长期开发研究海洋微生物及其酶产物和生产实践,开发提供高产碱性过氧化氢酶（简称过氧化氢酶）的海洋微生物菌株YS0810。 

本发明提供一株高产碱性过氧化氢酶的海洋微生物菌株YS0810（简称菌株YS0810）是从青岛海域底泥样品中筛选获得一株（种）高产碱性过氧化氢酶的海洋微生物菌株（Acinetobacter sp.）,将其命名为海洋微生物菌株YS0810（简称菌株YS0810）。对其16S rDNA基因序列同源性的系统发育分析,PCR产物测序结果显示菌株YS0810的16S rDNA如图1以及基因序列长度为1443bp。应用Blast程序与EzTaxon数据库（http://eztaxon-e.ezbiocloud.net/）分析，通过BioEdit程序进行多重序列比对后，利用MEGA5.1软件，采用Neighbor-Joining分析法最大似然法（Maximum-Likelihood Method）构建系统发育树。应用MEGA5.1软件进行系统发育树分析（图2），结合形态学观察结果，将高产碱性过氧化氢酶的海洋微生物菌株YS0810鉴定为不动杆菌属（Acinetobacter sp.）。该菌株YS0810于于2013年7月6日保藏于中国典型培养物保藏中心（简称CCTCC），保藏号为CCTCC NO：M2013315。 

本发明提供的海洋微生物菌株YS0810形态特征和生理生化特征： 

菌株YS0810（菌落）的形态特征： 

海洋微生物菌株YS0810为革兰氏阴性杆菌，无芽孢，平板培养24h形成2-3mm乳白色的菌落，表面光滑，边缘规则，有粘性，易挑起。从该菌株YS0810扫描电镜图（如图3）可以明显看出，该菌株YS0810为短杆菌，菌体体型较小，长度为1μm（左右），宽度为0.5μm（左右）。 

菌株YS0810生理生化特征: 

菌株YS0810生理生化特征见表1。表1为菌株YS0810与不动杆菌属各个种的分类学特征比较。 

表1 

Ⅰ，(A.baumanii)鲍氏不动杆菌；Ⅱ，(A.calcoaceticus)乙酸钙不动杆菌；Ⅲ，(A.haemolytius)溶血不动杆菌；Ⅳ，(A.johnsonii)约氏不动杆菌；Ⅴ，(A.junii)琼氏不动杆菌；Ⅵ，(A.lwoffi)鲁氏不动杆菌。 

一、海洋微生物菌株YS0810的菌种鉴定 

1）菌株YS0810形态特征