[发明专利]可分泌抗甲型肝炎病毒蛋白单抗的杂交瘤细胞及应用

说明书

技术领域

本发明涉及甲型肝炎免疫检测领域及蛋白纯化领域，尤其是涉及一种可分泌抗甲型肝炎病毒蛋白单抗的杂交瘤细胞及应用。

背景技术

甲型病毒性肝炎简称甲型肝炎，是由甲型肝炎病毒（甲肝病毒，Hepatitis A Virus，HAV）引起的一种肠道性疾病。甲型肝炎病毒（HAV）是正单链RNA病毒，属微小RNA病毒科。人类感染甲肝病毒后，大多表现为亚临床或隐性感染，仅少数人表现为急性甲型肝炎。甲肝病毒主要通过粪-口途径传播，潜伏期为15～45天，病毒常在患者转氨酸升高前的5～6天就存在于患者的血液和粪便中。发病2～3周后，随着血清中特异性抗体的产生，血液和粪便的传染性也逐渐消失，长期携带病毒者极罕见。其致病机制是肝炎病毒在肝脏复制，造成肝细胞损害而引起的一系列症状：如发热、厌油、厌食、腹痛、腹泻、黄疸等。甲型肝炎不仅危害人们的身心健康，对社会和家庭也会带来一定的经济损失。

单克隆抗体（单抗）可用于分析抗原的细微结构及检验抗原抗体未知的结构关系。生产出针对复杂生物混合物中的特定分子的抗体，可用于分离、分析及纯化该特定分子抗原。由单克隆抗体制备的试剂可用于临床诊断和治疗。

发明内容

基于此，有必要提供一种可分泌抗甲型肝炎病毒蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞及其应用。

此外，还有必要提供上述杂交瘤细胞或其分泌的单克隆抗体在医学检测领域的应用。

一种可分泌抗甲型肝炎病毒蛋白单抗的杂交瘤细胞，保藏号为CCTCC No：C2013131。

上述杂交瘤细胞可应用在制备诊断甲型肝炎检测试剂或检测设备领域中。

上述杂交瘤细胞可用于纯化重组甲型肝炎抗原。

一种由上述可分泌抗甲型肝炎病毒蛋白单抗的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。

上述单克隆抗体在制备诊断甲型肝炎检测试剂或检测设备领域的应用。

上述单克隆抗体在纯化重组甲型肝炎抗原中的应用。

一种甲型肝炎病毒检测试纸，其特征在于，包括上述单克隆抗体。

在其中一个实施例中，所述检测试纸包括支撑薄片、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸收垫、检测线及质控线，所述样品垫、所述金标垫、所述硝酸纤维素膜及所述吸收垫从所述支撑薄片的一端向另一端依次设置在所述支撑薄片上，所述样品垫与所述金标垫部分重叠，所述金标垫与所述硝酸纤维素膜部分重叠，所述硝酸纤维素膜与所述吸收垫部分重叠，所述检测线及所述质控线设在所述硝酸纤维素膜上，且所述检测线设在靠近所述金标垫的一端，所述质控线设在靠近所述吸收垫的一端，所述金标垫上涂覆有所述单克隆单体包附胶体金颗粒形成胶体金标记的单克隆抗体，所述检测线为亲和纯化的抗甲型肝炎病毒蛋白兔多抗，所述质控线为羊抗鼠IgG抗体。

一种检测试剂盒，包括上述任一实施例所述的甲型肝炎病毒检测试纸。

上述杂交瘤细胞，命名为HAV-3A2，于2013年8月28日保藏在湖北省武汉市武昌珞珈山武汉大学保藏中心（即中国典型培养物保藏中心），保藏号是CCTCC No：C2013131。

上述杂交瘤细胞的分泌产量高，其分泌得到的抗甲型肝炎病毒蛋白单克隆抗体具有高亲和力、高特异性等优点，可广泛应用在甲型肝炎的检测领域，如检测试剂或检测设备的制备领域等，在特异性、灵敏度和检测率等方面较之传统的检测方法具有显著的优势。

该杂交瘤细胞及其分泌的单克隆抗体可应用在重组甲型肝炎抗原的筛选纯化过程中，纯化得到的重组甲型肝炎抗原具有亲和力好、特异性强、纯度高、活性接近天然抗原的活性蛋白等优点，对于甲型肝炎的诊断和防止工作有着重要的意义。

附图说明

图1为一实施方式的检测试纸的正面示意图。

图2为图1中检测试纸的纵截面示意图。

图3为检测试剂盒示意图。

图4为实施例5中将免疫亲和纯化出的重组抗原经CsCl梯度分离后，将收集的各管悬液经放射免疫测定的浮密度测定结果图。

具体实施方式

以下组要结合附图及具体实施例对可分泌抗甲型肝炎病毒蛋白单抗的杂交瘤细胞及其应用作进一步详细的说明。

本实施方式的可分泌抗甲型肝炎病毒蛋白单抗的杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏号为CCTCC No：C2013131。该杂交瘤细胞可分泌出抗甲型肝炎病毒蛋白的单克隆抗体。该杂交瘤细胞及其分泌的单克隆抗体可用于制备甲型肝炎病毒蛋白的检测试剂或设备领域中。

一实施方式的甲型肝炎病毒蛋白的检测试剂盒包括壳体、检测试纸和其他检测试剂。