[发明专利]一种从红豆杉中提取紫杉醇的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从红豆杉中提取紫杉醇的制备方法。

背景技术

红豆杉(Taxus baccata L. )又名紫杉，属红豆杉科红豆杉属常绿乔木，是世界珍稀濒危的古老树种，至今已有200多万年的历史。而紫杉醇（Paclitaxel）系红豆杉属植物特有的次生代谢产物。紫杉醇为白色结晶体粉末，无臭，无味，不溶于水，易溶于氯仿、丙酮等有机溶剂。紫杉醇具有独特的抗肿瘤作用，是最具抗癌活性的天然化合物之一，已被多个国家批准应用于临床治疗卵巢癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、子宫癌等肿瘤疾病及艾滋病。目前紫杉醇主要从红豆杉植物中提取，但是因为含量较低（约0.01%），而且还有很多紫衫类烷化物的存在，故分离纯化难度较大。

目前报道中使用的提取分离方法有：萃取法、超临界萃取、膜分离法、树脂柱层析法等。萃取法步骤多，产物损失大；超临界流体萃取收率高、省时间，但该方法对设备要求高，操作条件严格，且用于粗提阶段成本过高，至今还难以进行大规模的实践应用；膜分离法可以进一步浓缩由粗提工艺获得的浸膏，提高紫杉烷类物质的浓度，但是半透膜和反渗透装置价格昂贵，同时需要复杂的操作技术。采用树脂法提取分离紫杉醇具有其它工艺无法比拟的优点，是目前在此领域中应用最为普遍的分离方法，但单独使用树脂柱层析进行分离，其纯化纯度还是有限。

发明内容

针对上述现有技术中的不足，本发明旨在提供一种新的能够从红豆杉中分离提纯紫杉醇的方法。

本发明涉及一种紫杉醇的分离纯化方法，包括以下步骤：

 提取液预处理：以红豆杉枝叶为原料进行提取，所得的提取液经浓缩后，用低级卤代烃、低级脂肪酸酯或正丁醇中的一种或几种进行萃取，所得萃取液经减压干燥得到紫杉醇粗品；

 分离提纯：将紫杉醇粗品用正己烷-乙酸乙酯溶液溶解，再通过模拟移动床色谱分离，得到富含紫杉醇的组分溶液；

 结晶、干燥：将富含紫杉醇的组分溶液浓缩、结晶、重结晶、干燥得到纯度99%以上的紫杉醇产品。

所述步骤中，提取方法可以是渗漉法、浸提法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、超临界流体萃取法。

所述步骤中，所述低级卤代烃可以是二氯甲烷或三氯甲烷，所述低级脂肪酸酯可以是乙酸乙酯。

所述步骤中，所述提取液可以先经过活性炭柱过滤脱色，再进行之后的浓缩和萃取步骤；浓缩时，控制固形物含量为40～60g/L。

所述步骤中，模拟移动床色谱填充的吸附剂为硅胶；紫杉醇粗品用体积比为7:3的正己烷-乙酸乙酯溶液溶解，每克紫杉醇粗品使用10～20ml正己烷-乙酸乙酯溶液进行溶解；解吸剂体积比为7:3的正己烷-乙酸乙酯溶液；吸附区流速1～2BV/h；解吸区流速1～2BV/h；切换时间为600～800s；温度控制在40℃～50℃；压力控制在0.2MPa～0.6MPa。

所述步骤中，所述富含紫杉醇的组分溶液可再以上述同样的模拟移动床色谱条件，重复分离1次或2次，以提高产品的纯度。

所述步骤中，将富含紫杉醇的组分溶液减压浓缩至析出结晶，抽滤出结晶后再用乙醇溶解进行重结晶，最后抽滤出结晶，于40℃真空干燥。

本发明还提供了一种从红豆杉中提取紫杉醇的方法，包括以下步骤：

 以红豆杉枝叶为原料，采用渗漉法或超声辅助提取法，以甲醇水溶液为提取溶剂进行提取，提取液减压浓缩得浓缩液；

 萃取浓缩液中的紫杉醇，萃取溶剂为低级卤代烃、低级脂肪酸酯、正丁醇中的一种或几种，所得萃取液减压浓缩至干得紫杉醇粗品；

 将紫杉醇粗品用正己烷-乙酸乙酯溶液溶解，再通过模拟移动床色谱分离，得到富含紫杉醇的组分溶液；

 将富含紫杉醇的组分溶液浓缩、结晶、重结晶、干燥得到纯度99%以上的紫杉醇产品。

所述步骤中，提取方式为室温下超声提取或40～50℃下渗漉提取，提取溶剂为70%～90%的甲醇水溶液，提取溶剂使用体积与原料质量之比为5～10ml/g，提取2～4次，合并提取液后将其浓缩至浓缩液中固形物含量为40～60g/L。

所述步骤中，所述低级卤代烃可以是二氯甲烷或三氯甲烷，所述低级脂肪酸酯可以是乙酸乙酯；所用萃取溶剂与浓缩液的体积比为1:1，萃取2～3次，合并萃取液。