[发明专利]D‑叔亮氨酸的一种生物催化制备方法有效
申请号: | 201310459718.2 | 申请日: | 2013-09-30 |
公开(公告)号: | CN104513839B | 公开(公告)日: | 2017-12-26 |
发明(设计)人: | 刘卫东;朱敦明;吴洽庆;陈曦;冯进辉;马延和 | 申请(专利权)人: | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
主分类号: | C12P13/06 | 分类号: | C12P13/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300308 *** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 亮氨酸 一种 生物 催化 制备 方法 | ||
1.一种利用内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶突变体作为生物催化剂来合成光学纯度>99%D-叔亮氨酸的方法,包括:对来源于Sybiobacterium thermopilum内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶StDAPDH进行组合突变,StDAPDH蛋白序列特征在于序列的121位或在同源性比较相当于121位的色氨酸(W)替换为亮氨酸(L);146位或在同源性比较相当于146位的苯丙氨酸(F)替换为亮氨酸(L);227位或在同源性比较相当于227位的组氨酸(H)替换为苯丙氨酸(F);所述突变体为上述三位点突变组合;以获得的组合突变体为生物催化剂,以3,3-二甲基-2-羰基丁酸与氯化铵作为底物构成的反应体系,加入辅酶循环体系进行催化还原胺化反应,制得光学纯度>99%的D-叔亮氨酸;辅酶循环体系包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH或NADP+),葡萄糖,葡萄糖脱氢酶(GDH)。
2.如权利要求1所述的方法,来源于Sybiobacterium thermopilum的内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶的GenBank号为AP006840.1。
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