[发明专利]一种以甘油残渣为原料制备菌体蛋白的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物发酵菌体蛋白的制备方法及其应用，具体涉及一种以甘油残渣为原料制备菌体蛋白的方法及其用于制备动物饲料中的应用，属于生物饲料领域。 

背景技术

甘油残渣是甘油经过蒸馏工艺处理后产生的一种含有甘油、聚甘油、水、盐等成分混合物。由于甘油蒸馏残渣的组分复杂，其除杂、脱色非常困难，产生了后续处理工艺复杂繁琐，处理成本高的瓶颈。因此甘油残渣长久以来被作为废物稀释后排放或填埋，造成了严重的环境污染。 

目前对甘油蒸馏残渣的处理利用，主要集中在提炼其中的聚甘油。2008年中国专利申请中公开了“从甘油渣中提取聚甘油的方法”，该方法采用添加有机溶剂萃取等多次工艺处理甘油残渣达到回收聚甘油的目的；魏代军等通过对甘油残渣预处理，脱盐，乙醇回收等多重工艺实现对甘油残渣的回收利用（魏代军等.甘油蒸馏残渣的回收利用，表面活性剂工业，2000，2，23～24）。上述方法都是通过采取复杂工艺处理甘油残渣，在二次回收利用甘油残渣中增加了各种成本的投入，同时产生二次污染。 

环境中存在的许多有机物，都能找到可以使之降解或转化它的微生物。同时微生物处理技术因其生产费用低、无二次污染等特点被视为应用前景广阔的技术。甘油残渣中主要成分就是甘油和聚甘油，这两种有机物可以作为微生物的碳源。因此借助微生物转化技术，将甘油残渣作为微生物生长的原料，使其转化为菌体蛋白，一方面消除甘油残渣带来的环境污染问题，另一方面变废为宝实现菌体蛋白的生产。 

发明内容

本发明的目的是提供一种以甘油残渣为原料制备菌体蛋白的制备方法。 

本发明采用的技术方案是： 

   本发明的一个目的是公开一种以甘油残渣为原料制备菌体蛋白的方法，该制备方法具体包括如下步骤：

1）将甘油残渣用水稀释得甘油残渣稀释液，其中甘油残渣的质量分数为15～40%；

2）向甘油残渣稀释液中分别加入占甘油残渣稀释液质量分数为1～5%的非蛋白氮源，0.5～1.5%的磷酸盐，0.05～0.5%的镁盐，1～5%的氯化钠，混合均匀后用盐酸调节混合液的pH值为6.5～7.5，可得菌种的发酵培养基；

3）将发酵培养基装入摇瓶，并向发酵培养基中接入发酵菌种，菌种接种量为发酵培养基的4～8%，接种完成后将摇瓶置于摇床上，调整摇床转速为150r /min，发酵温度为30～32℃进行发酵培养72～96h；

4）发酵完成后，使用离心机将发酵液离心得到沉淀物，其中离心转速为4000 r/min，离心时间为20min；将沉淀物置于真空干燥箱中50～65℃烘至恒重得菌体蛋白粗品，将所得菌体蛋白粗品用粉碎机粉碎后即可得到本发明菌体蛋白。

上述所述制备方法中，所述的磷酸盐为磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠或焦磷酸中的一种或多种。所述的非蛋白氮源为酵母提取物、蛋白胨、硫酸铵、氯化铵、硝酸钾、和硝酸钠的一种或多种。所述的镁盐为硫酸镁和氯化镁中一种或两种。 

上述所述制备方法中，所述的菌种为热带假丝酵母（Candida tropicalis）、灰绿葡萄孢菌（Botrytiscinerea）和白地霉（Geotrichum candidum）中一种或多种。所述步骤3）中摇瓶的装液量为20%，如500 mL的三角瓶装入100 mL的发酵培养基，或者250mL的三角瓶装入100 mL的发酵培养基。 

在此基础上，本发明的另一目的是请求保护一种采用上述制备方法制备得到的菌体蛋白。 

本发明的再一目的是请求保护上述制备方法制备得到的菌体蛋白的一种具体用途，即所述菌体蛋白在制备动物饲料中的用途。所述菌体蛋白首先制备成菌体蛋白饲料，然后与普通饲料混合使用。其中： 

作为本发明所优选的一种实施方式，所述的动物饲料为鸡饲料，所述菌体蛋白饲料的质量百分组成为玉米45%，豆粕43.7%，菌体蛋白粉4.2%，大豆油2.8%，碳酸钙1%，蛋氨酸0.2%，食盐0.5%，胆碱0.2%，多维0.4%，填充剂2%；所述菌体蛋白饲料和普通饲料的混合比优选为28：2。

作为本发明所优选的另一种实施方式，所述的动物饲料为犊牛饲料，所述菌体蛋白饲料的质量百分组成：玉米70%，豆粕16.6%，菌体蛋白粉6%，麦麸4%，磷酸轻钙1%，食盐0.4%，预混料 2%；所述菌体蛋白饲料和普通饲料的混合比优选为27：3。