[发明专利]一种检测糖皮质激素治疗SLE疗效的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测糖皮质激素治疗SLE疗效的试剂盒，具体涉及一种基于GR基因多态性检测糖皮质激素治疗SLE疗效的试剂盒和方法，属于医药卫生技术领域。 

  

背景技术

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus, SLE）是一种常见的自身免疫性疾病，世界范围内SLE的发病率约为50/10万，我国约为70/10万。该病多见于女性，男女发病率比约为1:9。近年来，SLE发病率和患病率不断升高，对青中年女性的身心健康造成了很大危害，已经成为一个重要的公共卫生问题。SLE的药物治疗主要以糖皮质激素（glucocorticoids，GC）为主。GC具有强大的抗炎和免疫抑制作用，其主要作用机制是基因调控途径，即与细胞浆内的糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor，GR）相结合，形成GC-GR复合物，转移入细胞核内，通过基因调控机制发挥作用。可见，GR 是GC发挥生理和药理作用的重要环节。 

制定个体化治疗方案是 SLE 治疗的基本原则。临床实践表明GC的临床疗效存在极大的个体化差异，有相当一部分患者病情不能迅速得到缓解。同时，GC的应用结果像一把双刃剑，在取得疗效的同时也会导致许多不良反应，有的不良反应甚至会直接导致患者死亡。这给SLE患者的临床合理用药带来严重困难。目前, 临床医生对SLE患者是否应该给予GC治疗，治疗后在病程不同阶段应该使用何种剂量，病情稳定后应该如何调整剂量等都还主要依靠临床经验进行尝试性治疗，导致相当一部分病人不能适时的得到最佳治疗。 

药物基因组学是继人类基因组计划完成之后出现的功能基因组学研究的一个分支，它的出现对于提高药物疗效，减轻不良反应具有重要的意义。药物基因组学介导的个体化用药就是药物治疗在充分考虑每个病人的遗传因素基础上制定安全、合理、有效、经济的药物治疗方案。近年，国际权威杂志《N Engl J Med》、《Science》等刊登的研究证据表明药物基因组学研究在转化应用中能够迅速获得回报。药物基因组学的主要手段是检测相关基因的单核苷酸多态性（single neucleotide polymorphism, SNP）。这种SNP可能会影响到其所表达的蛋白质的功能，或者影响蛋白质的表达水平，进而影响与其相互作用的外源性分子的效应，即药物疗效。不久的将来，患者基因型将成为确定患者个体化治疗的重要依据。 

当前，迫切需要风湿科医生治疗SLE病人时能够在充分考虑每个病人的遗传因素基础上制定安全、合理、有效、经济的药物治疗方案。GR 是GC发挥生理和药理作用的重要环节，目前本领域缺乏基于GR基因（NR3C1）多态性检测糖皮质激素治疗SLE疗效的方法和试剂盒。 

  

发明内容

本发明的目的是提供一种基于GR基因多态性检测糖皮质激素治疗SLE疗效的试剂盒和方法。 

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案： 

一种基于GR基因多态性检测糖皮质激素治疗SLE疗效的试剂盒，包括以下试剂，保存温度为-20℃：

（1）检测GR基因序列的引物；

（2）PCR扩增酶，纯化PCR产物的纯化酶及相应缓冲液；

（3）dNTP；

（4）单碱基延伸反应酶及相应的缓冲液。

所述的检测GR基因序列的引物包括扩增基因序列多态性位点的引物以及单碱基延伸基因序列多态性位点的延伸引物。 

所述的GR基因序列的分子标记为rs10482672，rs4912905，rs17100234和rs7701443。 

所述的扩增rs10482672多态性位点的引物： 

5’- CAAAGCAGGGCTGGGCTTTACT -3’ 

5’- TGTTGTGTTTGCATATCCATGAGAGTT -3’

所述的扩增rs4912905多态性位点的引物：

5’- GAAGAACTTGCCAAGAGGCTAGAGAA -3’

5’- CAATTCATTGACCTTACAGAATCACTGG -3’

所述的扩增rs17100234多态性位点的引物：

5’- GCATAAAGCCAAAACCTGAAAAGAAGA -3’ 

5’- AAATGGGGCCAGCCTACAACTG -3’

所述的扩增rs7701443多态性位点的引物：