[发明专利]多重PCR检测志贺氏菌群/血清型的引物组和试剂盒无效
| 申请号： | 201310425567.9 | 申请日： | 2013-09-17 |
| 公开（公告）号： | CN103451307A | 公开（公告）日： | 2013-12-18 |
| 发明（设计）人： | 王晓艳;王雷;王彦威;张志强 | 申请（专利权）人： | 北京卓诚惠生生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/10;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 穆宏平 |
| 地址： | 102206 北京市昌*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多重 pcr 检测 志贺氏菌群 血清 引物 试剂盒 | ||
1.一种多重PCR检测志贺氏菌群/血清型的引物组，其特征在于，其是由检测宋内志贺氏菌、福氏1-5型志贺氏菌、痢疾Ⅰ型志贺氏菌、福氏6型志贺氏菌和志贺氏菌属的引物对组成；
所述检测宋内志贺氏菌引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示；
所述检测福氏1-5型志贺氏菌引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示；
所述检测痢疾Ⅰ型志贺氏菌引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示；
所述检测志贺氏菌属引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8所示；
所述检测福氏6型志贺氏菌引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10所示。
2.一种对志贺氏菌群/血清型进行多重PCR检测的方法，其特征在于，将权利要求1所述引物组与待测样品提取的总DNA进行多重PCR反应，反应结束后对PCR扩增产物进行电泳分析以确定样品是否为志贺氏菌属并判断志贺氏菌群/血清型。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在进行多重PCR反应时，反应体系中还加入阳性内对照引物对。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述阳性内对照引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示。
5.根据权利要求2-4任一项所述的方法，其特征在于，所述多重PCR反应按以下步骤进行：
a：95℃ 4min；
b：95℃ 30s，
c：55-68℃ 30-60s，
d：72℃ 30-120s，b-d循环30-35个反应；
e：72℃ 5-10min。
6.一种快速检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的引物组、阳性内对照引物对、阳性内对照模板、DNA聚合酶、反应体系缓冲液、Mg2+、dNTP和去离子水。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于北京卓诚惠生生物科技有限公司，未经北京卓诚惠生生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310425567.9/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
