[发明专利]一种蓝桉醛-Ⅲ的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药制药领域，涉及一种从富含蓝桉醛-Ⅲ的原料中制备蓝桉醛-Ⅲ的方法。

背景技术

蓝桉醛-Ⅲ是存在于桃金娘科(Myrtaceae) 厚桉Eucalyptus incrassata Labll.叶的一种倍半萜醛类化合物。蓝桉醛-Ⅲ，英文名为Euglobal-Ⅲ，分子式C₂₈H₃₈O₅，分子量454.61，分子结构式如下：

蓝桉醛-Ⅲ具有多重药理作用，具有抗促瘤作用，显著抑制TPA诱导的EBV-EA的活性，在本品与TPA分子比为1000时，抑制率100%，分子比为500时，抑制率70%以上；具有抗炎作用，能抑制肉芽形成。

经检索，尚未有采用硅胶氧化铝混合柱分离蓝桉醛-Ⅲ的报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题就是利用超声，快速从富含蓝桉醛-Ⅲ的原料中提取蓝桉醛-Ⅲ，在保持高提取率的同时缩短了提取时间。

本发明的技术方案是：将厚桉叶原料粉碎处理，用亲水性有机溶剂超声提取2-4次，提取液回收试剂得浸膏；将硅胶氧化铝混合均匀装柱，上样，混合溶剂梯度洗脱，合并富含蓝桉醛-Ⅲ的流分，回收洗脱溶剂，再次上硅胶氧化铝混合柱层析，混合溶剂梯度洗脱，回收溶剂，静置结晶，再采用石油醚-丙酮或环己烷-乙醇重结晶，过滤，冷冻干燥得产品。

所述富含蓝桉醛-Ⅲ的原料为：白桂皮科植物（Canellaceae）白桂皮、乌干达沃伯木的树皮。

所述的亲水性有机溶剂是甲醇、乙醇、丙酮中的一种或几种的混合溶液。

所述的硅胶氧化铝柱层析：硅胶和氧化铝的比例为1：2-8：1，氧化铝为中性氧化铝，第一次柱层析硅胶和氧化铝的目数均为80-120目，第二次柱层析硅胶和氧化铝的目数均为200-300目。

所述的第一次洗脱用混合溶剂的体积比为正己烷-甲醇（10:1，8:1，4:1，1:1），第二次洗脱用混合溶剂的体积比为正己烷-甲醇（50:1，42:1，30:1，20:1）。

所述的重结晶条件为：结晶温度为-4℃-10℃，重结晶1-4次。

与现有技术比较，本发明具有的优势在于：本发明得率高，提取过程采用密闭体系，溶剂消耗少，同时提高了生产安全性；硅胶氧化铝混合柱层析，分离效果好，制备量大；操作简单，易放大工业化。

具体实施方式：

实施例1：

取厚桉叶1kg，经粉碎处理后用甲醇超声提取2次，提取液回收试剂得浸膏，按1：2体积比称取硅胶（80目）和中性氧化铝（80目），混合均匀装柱，将浸膏与等量硅胶混合均匀，上硅胶氧化铝柱进行层析，用正己烷-甲醇以（10:1，8:1，4:1，1:1）梯度洗脱，合并富含蓝桉醛-Ⅲ的流分，回收洗脱溶剂，再次上硅胶氧化铝（200目）混合柱层析，用正己烷-甲醇以（50:1，42:1，30:1，20:1）梯度洗脱，回收溶剂，静置结晶，再采用石油醚-丙酮在-4℃条件下重结晶4次，滤出结晶物，冷冻干燥得产品0.73g。

实施例2：

取厚桉叶1kg，经粉碎处理后用丙酮超声提取4次，提取液回收试剂得浸膏，按8：1体积比称取硅胶（120目）和中性氧化铝（120目），混合均匀装柱，将浸膏与等量硅胶混合均匀，上硅胶氧化铝柱进行层析，用正己烷-甲醇以（10:1，8:1，4:1，1:1）梯度洗脱，合并富含蓝桉醛-Ⅲ的流分，回收洗脱溶剂，再次上硅胶氧化铝（300目）混合柱层析，用正己烷-甲醇以（50:1，42:1，30:1，20:1）梯度洗脱，回收溶剂，静置结晶，再采用环己烷-乙醇在-10℃条件下重结晶，滤出结晶物，冷冻干燥得产品0.68g。

实施例3：

取厚桉叶10kg，经粉碎处理后用甲醇和乙醇的混合溶剂超声提取3次，提取液回收试剂得浸膏，按3：1体积比称取硅胶（100目）和中性氧化铝（100目），混合均匀装柱，将浸膏与等量硅胶混合均匀，上硅胶氧化铝柱进行层析，用正己烷-甲醇以（10:1，8:1，4:1，1:1）梯度洗脱，合并富含蓝桉醛-Ⅲ的流分，回收洗脱溶剂，再次上硅胶氧化铝（300目）混合柱层析，用正己烷-甲醇以（50:1，42:1，30:1，20:1）梯度洗脱，回收溶剂，静置结晶，再采用环己烷-乙醇在-8℃条件下重结晶2次，滤出结晶物，冷冻干燥得产品6.4g。